上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍，标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。以下与此有关的叙述中，正确的是（    ）

A．所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因

B．可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛

C．人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因

D．运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异

用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是（    ）

A．常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒

B．DNA连接酶和 RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶

C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（    ）

A．体外受精完成后即可进行胚胎移植操作

B．胚胎干细胞具有发育全能性，它可发育成新个体

C．诱导胚胎干细胞分化成器官的培养基中不需要加入饲养层细胞

D．通过胚胎移植产生多个后代的繁殖方式都属于有性生殖

对下图所示粘性末端的说法正确的是（    ）

A．甲、乙、丙黏性末端是由两种限制性核酸内切酶作用产生的

B．图乙中的酶切位点在A与G之间

C．如果甲中的G发生突变，限制性核酸内切酶可能不能识别该切割位点

D．构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处

已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是（    ）

A．3                            B．4                   C．9                   D．12

基因工程中构建重组质粒时，用同一种限制性内切酶切割DNA，被水解的磷酸二酯键至少

A．2个          B．4个              C．6个              D．8个

现有一长度为3000碱基对（bp）的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是（    ）

下表为常用的限制性核酸内切酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法

正确的是（    ）

（注：Y＝C或T，R＝A或G）

A．限制酶切割后不一定形成黏性末端         

B．限制酶的切割位点一定在识别序列的内部

C．不同限制酶切割后一定形成不同的黏性末端 

D．一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列

（16分）玉米的光合效率较水稻的高，这与玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）有很大的关系。如何将玉米的这一种酶转移到水稻等植物上一直是植物生物学家的研究课题之一。但实践证明，常规杂交育种手段很难如愿以偿。最近，有人利用土壤农杆菌介导法，将完整的玉米PEPC基因导入到了水稻的基因组中，为快速改良水稻的光合作用效率，提高粮食作物产量开辟了新途径。

（1）玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交是因为                                     。

（2）获得PEPC基因后，将其导入土壤农杆菌的质粒中，获得重组质粒需要的工具酶是          ，请在下框中补充某DNA片段并画出切割形成黏性末端的过程示意图。

（3）导入完成后得到的土壤农杆菌，实际上只有少数导入了重组质粒，可根据质粒中含有的      筛选出成功导入了重组质粒的土壤农杆菌。

（4）用含有重组质粒的土壤农杆菌感染水稻细胞，即使感染成功，PEPC基因通过一定途径整合到水稻的基因组中，但不一定会表达，原因最可能是            。

A．玉米和水稻不共用一套密码子   

B．水稻中缺乏合成PEPC的氨基酸

C．PEPC基因受到水稻基因组中相邻基因的影响

D．整合到水稻基因组中的PEPC基因被水稻的某种酶破坏了

（5）PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是                                     。

如目的基因完成了表达 ，则其表达过程可表示为                               。

（6）得到PEPC基因成功表达的水稻细胞后，科研人员常采用                 方法获得转基因水稻植株。

（13）根据细胞全能性理论，运用现代生物技术对生物进行无性生殖在生产上具有重大意义。

请回答下列有关问题：

Ⅰ．为保持某观赏植物优良的遗传性状，某科技小组利用植物组织培养技术来进行繁殖。他们将该植物的花芽分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，得到的花芽生长状况如下表：

                          A组            B组            C组                D组                        E组

吲哚乙酸         0                  3ppm          3ppm              0.03ppm                0

细胞分裂素     0                  0.2ppm      0.002ppm      1.0ppm                  0.2ppm

花芽生

长状况      仍是组织切块  形成愈伤组织  愈伤组织分化出根   愈伤组织

分化出嫩枝     稍生长

①在此过程中能实现脱分化的花芽有那些组？                        

②从实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的二种重要物质。其中，新芽形成必须的条件是                                               ；而在培养形成完整新个体过程中的不同培养期，对它们的调控关键是                                                                 。

Ⅱ．我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形成兰花植株示意图，请据图回答：

(1)过程③和④要经过              和                 。

(2)在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入                 。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证                       。

(3)从育种的角度来看。植物组织培养与有性繁殖相比，优势主要有(列举两条)          、             

(4)与植物组织培养的培养基相比，用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外，通常还要添加                。