31.(16分)

T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。

(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除________________,因为后者产生的________________会抑制侧芽的生长。

(2)为筛选出已转化的个体,需将T1代播种在含________________的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T2代)。

(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T2代播种在含________________的培养基上,获得所需个体。

(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与________________植株进行杂交,再自交________________代后统计性状分离比。

(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性________________

(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取________________植株的DNA,用限制酶处理后,再用________________将获得的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取________________作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。

 0  32189  32197  32203  32207  32213  32215  32219  32225  32227  32233  32239  32243  32245  32249  32255  32257  32263  32267  32269  32273  32275  32279  32281  32283  32284  32285  32287  32288  32289  32291  32293  32297  32299  32303  32305  32309  32315  32317  32323  32327  32329  32333  32339  32345  32347  32353  32357  32359  32365  32369  32375  32383  170175 

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