47．(7分)番茄果实成熟过程中，某种酶(PG)开始合成并显著增加，促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见图解)，可有效解决此问题。该技术的核心是，从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA，继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞，经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中，反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(靶mRNA)互补形或双链RNA，阻止靶mRNA进一步翻译形成PG，从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答：

(1)若要将人工合成的完整反义基因克隆出成百上千的反义基因，可用        (写出中文名称)技术实现体外快速扩增。

(2)假设PCR反应中的初始只有一个DNA作为模板， n轮循环的产物中含有模板DNA链的DNA分子有     个、含有人工合成的DNA引物的DNA分子有    个。若DNA分子中共含900个碱基对，碱基数量满足：(A+T)／(G+C)=1／2，经5次循环，至少需要向试管中加入     个腺嘌呤脱氧核苷酸(不考虑引物所对应的片段)。

(3)PCR反应中所用到的酶是      ，其具有       的特性。

(4)普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，脱分化后得到           ，再转接到分化培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株。

 46．（9分）下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)             技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养的目的是        。在培养过程中为防止杂菌感染，应向培养液中添加              ；其体外培养需用CO²培养箱，其中CO²的主要作用是           。

(3)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用              。

(4)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是         。

(5)单克隆抗体与传统抗体相比，其优点是            。(3分)

45．抗维生素D佝偻病是伴X显性遗传病(用D、d表示该对等位基因)。甲为该病患者，其丈夫正常。现对孕妇甲及其丈夫和他们的双胞胎孩子用探针进行基因诊断。检测基因d的探针为d探针，检测基因D的探针为D探针。观察到如下结果(空圈代表无放射性，深颜色圈放射性强度是浅颜色圈的2倍)。根据杂交结果，下列说法不正确的是

A．个体2、3的基因型分别是X^dY、X^dX^d

B．若个体l与表现型正常的异性婚配，后代中女性患病率约为50％

C．若这对夫妇生一男孩，则其正常的概率为1／2

D．他们的双胞胎后代一定来自两个受精卵

44．  “筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的有几项

①重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来②单克隆抗体制各过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞③单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞④基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得韵产物筛选后导入受体细胞⑤为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定的体细胞才能进行组织培养

  A．二项    B．三项    C．四项    D．五项

43．下列利用普通二倍体鱼培育三倍体转基因鱼的技术不合理的是

  A．让二倍体鱼的精子染色体数目加倍再受精

  B．将目的基因导入二倍体或四倍体的受精卵

  C．将转基因四倍体纯种与二倍体进行杂交 

D．设法使染色体数目加倍以获得四倍体

42．根据每个细胞中核DNA相对含量的不同，将某高等哺乳动物精巢中连续增殖的精原细胞归为A、B、C三组，每组细胞数目如图l所示；将精巢中参与配子形成过程的细胞归为D，E，F三组，每组细胞数目如图2所示；根据细胞中每条染色体上DNA含量在细胞周期中的变化绘制曲线，如图3所示。下列叙述中错误的是

  A．图l中C组的细胞不都位于图3的乙-丙段

  B．如果对图l的精原细胞进行处理，使其DNA不能复制，则一段时间后A组细胞数目增加，C组细胞数目减少

  C．图2中F组细胞变成E组细胞的过程发生在图3的乙-丙段

  D．图2中D组和E组细胞均不含同源染色体

41．降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：

获得的双链DNA经EcoRI(识别序列和切割位点和BamHI(识别序列和切割位点)双酶切后插入大肠杆菌质粒中。下列有关分析错误的是

  A．Klenow酶是一种DNA聚合酶    B．合成的双链DNA有144个碱基对

  C．EcoRI和BamHI双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

  D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

40．双脱氧核苷酸常用于DNA测序，其结构与脱氧核苷酸相似，能参与DNA的合成，且遵循碱基互补配对原则。DNA合成时，在DNA聚合酶作用下，若连接上的是双脱氧核苷酸，子链延伸终止；若连接上的是脱氧核苷酸，子链延伸继续。在人工合成体系中，有适量的序列为GTACATACATG的单链模板、腺嘌呤双脱氧核苷酸和4种脱氧核苷酸。则以该单链为模板合成出的不同长度的子链最多有

  A．2种  B．3种  C．4种  D．5种

39．植株甲是二倍体水稻，利用植株甲获得了植株乙，而后利用植株甲和乙又获得了植株丙和丁。培养过程如右图所示。下列有关叙述正确的是

  A．用秋水仙素处理植株甲的雌蕊柱头可获得植株乙

  B．植株丙与植株丁的体细胞中染色体组的数目相同

  C．植株甲与植株乙正交和反交所得种子的胚乳的基因型不同

  D．植株丙和植株丁的获得说明植株甲与植株乙是一个物种 

38．下列关于愈伤组织的说法正确的是

A．愈伤组织的代谢类型是自养需氧型

B．以同一株绿色开花植物的任何细胞经组织培养获得的愈伤组织的基因型均相同

C．不可以通过将人工种皮包裹愈伤组织的方法获得人工种子

D．愈伤组织由高度分化的细胞组成