下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有______________________个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越______________________。

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是______________________。

（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______________________。

（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______________________酶。

（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______________________。

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在______________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库___________基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。

（2）①过程提取的DNA需要______________的切割，B过程是_____________。

（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用______________________扩增的方法，其原理是______________________。

（4）目的基因获取之后，需要进行______________________，其组成必须有______________________以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。

（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是______________________，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是______________________，可以用______________________技术进行检测。

某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是

A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒

B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶

C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：

材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份l0g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于一20℃条件下保存24h。

DNA粗提取：

第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入l5mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。

第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。

第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol／LNaCl溶液溶解上述絮状物。

DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。

分析上述实验过程，回答下列问题：

(1)该探究性实验课题名称是__________________________________。

(2)第二步中”缓缓地”搅拌，这是为了减少__________________________________。

(3)根据实验结果，得出结论并分析。

①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。

结论2：___________________________________________________。

②针对结论I．请提出合理的解释：__________________________________。

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：___________________________________________________，然后用体积分数为95％的冷酒精溶液使DNA析出。

PCR（多聚酶链式反应）技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（1）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是 _________________。

A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键

B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键

C.该过程不需要解旋酶的作用

D.该过程与人体细胞的过程完全相同

（2）C过程要用到的酶是。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以_________________加入,_________________（需要/不需要）再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有:_________________________________。

（3）如果把模板DNA的两条链用¹⁵N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃~55℃~72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有¹⁵N标记的DNA占_________________。

（4）如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸个_________________。

（5）PCR中由碱基错配引起的变异属于_________________。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占_________________。

下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有

A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞

B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质

C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化

Ⅰ.下面图一为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图，图二为胡萝卜素的纸层析结果示意图，请据图回答下列问题。

（1）图一中b的名称是_________________，a的作用是_________________，e为_________________，对于e实验时应注意_________________，f为_________________，常用_________________，如果层析液没及e会导致_________________。

（2）图二中A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是_____，属于提取样品的样点是_____。基线一般距底边________cm；在图中的层析谱中，①代表的物质是_______，②代表的物质是___________。

Ⅱ.为了探讨提取溶剂系统对类胡萝卜素提取的影响，科研人员分别用六种不同的溶剂系统按相同的提取步骤进行提取，比较类胡萝卜素的含量，以寻找不同植物品种的最佳的提取溶剂，请据图表作答：。

（1）表中所用的提取溶剂，均为有机溶剂，原因是____________。

（2）在本实验中，提取步骤必需相同，理由：________________。

（3）请依据图一，写出它的实验课题：______________________________，其实验自变量为__________，因变量为___________。

（4）从图一和图二及两者比较中，你能得出哪两个结论？_________________________。

下列是与芳香油提取有关的问题，请回答：

（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有__________________________________的性质。蒸馏时收集的蒸馏液_________________（是、不是）纯的玫瑰精油，原因是__________________________________。

（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和_________________。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是_________________。

（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油的提取量会__________________________________，原因是__________________________________。

（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好放在温度__________________________________的地方，目的是______________________________________。

(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如下图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为_________________天左右。

（6）从薄荷叶中提取薄荷油时_________________（能、不能）采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是___________________________________________________。

请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：

（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、_________________和_________________。

（2）芳香油溶解性的特点是不溶于_________________，易溶于__________________________________，因此可用_________________作为提取剂来提取芳香油。

（3）橘子果实含有芳香油，通常可用_________________作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是_________________。

　　（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是___________________________________________________。

　　（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的_________________层，原因是_________________。加入氯化钠的作用是__________________________________。

　　（6）从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此剂的作用是_________________。

葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：

（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）该微生物通过无氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，产生的终产物是＿＿＿＿和＿＿＿＿。

（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同学的错误是＿＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。

（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。