ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下:

第①步:用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步:将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步:将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除,用一段红霉素抗性基因取代之,得到重组质粒2。

第④步:将重组质粒2导入蓝藻细胞,由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同,所以能准确地与其发生同源重组,产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料,回答下列问题:

(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶?        

PCR扩增DNA时必须加入引物,引物的实质是          ,其作用是                                

(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环,每次循环都要经过三个步骤,其中“复性”这一步骤发生的变化是                   。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响,应如何设置对照?                      

(3)构建重组质粒1

2时,为保证成功率,往往使用                      

对基因和质粒进行切割,以切出相同的黏性末端,便于连接。此酶的作用是将DNA分子的              键打开。

(4)质粒是基因工程中最常用的运载体,其化学本质是         ,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

(5)导入重组质粒2以后,往往还需要进行检测和筛选,可用            制成探针,检测是否导入了重组基因,在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

 0  31216  31224  31230  31234  31240  31242  31246  31252  31254  31260  31266  31270  31272  31276  31282  31284  31290  31294  31296  31300  31302  31306  31308  31310  31311  31312  31314  31315  31316  31318  31320  31324  31326  31330  31332  31336  31342  31344  31350  31354  31356  31360  31366  31372  31374  31380  31384  31386  31392  31396  31402  31410  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网