为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进一步降解,分析片段大小。下列是某小组进行的相关实验。
| 已知一线性DNA序列共有5 000bp(bp为碱基对) | 第一步水解 | 产物(单位:bp) | 第二步水解 | 产物(单位:bp) |
| A酶切割 | 3 100 | 第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 | 1 900 200 | |
| 1 400 | 800 600 | |||
| 1 000 | 1 000 | |||
| 500 | 500 | |||
| B酶切割 | 2 500 | 将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 | 1 900 600 | |
| 1 300 | 800 500 | |||
| 1 200 | 1 000 200 | |||
| 经A酶和B酶同时切割 | 1 900 1 000 800 600 500 200 | |||
⑴该实验设计主要体现了____________________原则。
⑵由实验可知,在这段已知序列DNA分子上,A酶和B酶的识别位点分别为____________________个和____________________个。
⑶根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点。
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⑷已知BamH 与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,
|
若干循环后 ____________________和____________________序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化____________________键的形成。
⑸一个基因表达载体的组成除了目的基因外,还必须有_________、___________及标记基因。
近期统计数据显示,癌症已经成为我国城乡居民的首要死因。请根据提供的材料回答问题:
⑴体外分别培养某癌细胞和正常体细胞时,如果正常细胞的一个基因突变,能否像癌细胞一样无限增殖?____________________。在体内,癌细胞可能侵袭周围正常组织,说明癌细胞具有____________________的特性。
⑵细胞癌变后,膜表面会出现一些不同于正常细胞的蛋白质,这些蛋白质会成为____________________,引起机体的免疫应答,在应答中能直接使癌细胞裂解的免疫细胞是____________________。
⑶端粒酶是与染色体末端结构相关的一种细胞组分。表中数据显示细胞癌变可能与端粒酶的活性有关,请完成下面的探究实验:
| 细胞类型 | 增殖代数 | 端粒酶活性 |
| 正常体细胞 | 50~60 | 无 |
| 癌细胞 | 无限 | 有 |
实验目的:探究端粒酶与细胞癌变的关系。
实验材料:癌细胞、端粒酶抑制剂、细胞培养液等。
实验步骤:
①______________________________________________________________________。
②______________________________________________________________________。
③______________________________________________________________________。
结果预测及分析:________________________________________________________。
⑷请根据上述内容,提出一种治疗癌症的新思路:______________________________。