植物体细胞杂交过程中一定要使用的是                       （    ）

①纤维素酶和果胶酶    ②胰蛋白酶   ③聚乙二醇   ④灭活的病毒

A．①                 B．①②           C．①③           D．①④

 关于现代生物技术的叙述错误的是

A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质

B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体

C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒

D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养

农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：

(1)要获得该抗病基因，可采用__________、__________等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的运载体是__________。

(2)要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用__________进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是(　　)

 (3)切割完成后，采用__________将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为__________。

(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去__________棉花细胞，利用植物细胞具有的__________性进行组织培养，从培养出的植株中__________出抗病的棉花。

(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是(　　)

A．淀粉                                   B．脂类

C．蛋白质                               D．核酸

(6)转基因棉花获得的__________是由该表达产物来体现的。

 在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。右图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：

(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、_________________、

将目的基因导入受体细胞、_________________。

（2）A过程需要的酶有            和             。

（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用_________________处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为_________________态；然后将                      在缓冲液中混合培养完成转化过程。

（4）含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过［C］_________________和［E］_________________。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入_________________。

(5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_________________。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是_________________。

（6）如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括__________。

A.生物安全     B.环境安全    C.食品安全     D.伦理道德问题

（7）抗虫基因基因能在植物体内成功表达是因为                             。说明苏云金杆菌和植物等生物共用                           。

 为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶作用于图中的______处，DNA连接酶作用于____处。(填“a”或“b”)

(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法是______________除此之外，还有基因枪法和花粉管通道法。

(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用____________技术，该技术的核心是_______和_______。

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测，又要用_________________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

 Ⅰ.(1)在植物组织培养过程中，由于细胞一直处于                状态，因而容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响而产生突变，突变体经过进而发育成为新品种。

（2）突变体产生的原理是                  ，由于具有              的特点，所以需要进行          。

（3）如果要用突变体生产药物或食品添加剂，要培养至           阶段，若要生产人工种子，则需要培养至          阶段。

Ⅱ.家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

（1）进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

 金花茶是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，降低观赏价值。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种。请据图回答：

（1）将②连接到①并形成③，常用到的酶是_______________和___________________。

（2）②与①上的某种抗药性基因在结构上的最大区别：②的基因结构的编码区内有______________和_____________；而①是_____________，它的基因结构的特点是___________________________________。

（3）经检测，被③侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性，这说明②已经在金花茶细胞内得到________。欲快速培育大量该抗病新品种，应该采用的技术为______________________。

ω－3脂肪酸是深海“鱼油”的主要成分，它对风湿性关节炎以及糖尿病等有很好的预防和辅助治疗作用。科学家从一种线虫中提取出相应基因，然后将该基因导入猪胚胎干细胞，以期得到富含ω－3脂肪酸的转基因猪。下列相关叙述正确的是(　　)

A．从线虫中提取目的基因需要特定的限制性内切酶，此酶作用于氢键

B．构建重组DNA时，常用的运载体是质粒，受体细胞可以是胚胎干细胞，也可以是受精卵

C．培养胚胎干细胞的培养基中，所加入的动物血清也是植物组织培养必需成分

D．培育转基因猪需利用到转基因技术、动物细胞培养技术、核移植技术

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是(　　)

①A过程需要的酶主要有限制性内切酶和DNA连接酶　②B过程需要加入卡那霉素进行选择培养　③C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质、琼脂和激素　④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测　⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测

A．①②③④⑤　　　 B．①②④⑤      C．③④⑤      D．①③④⑤

 下列关于生物技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的说法是

A．转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存  

B．运用重组基因技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器

C．我国的政策是禁止进行生殖性克隆人

D．转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏源或者引起中毒