目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质粒是较早构建的质粒载体,其主要结构如图一所示。

(1)建构基因表达载体时,必须有               、复制原点、目的基因、终止子以及                                   

(2)构建人工质粒时要有抗性基因,以便于                   

(3)pBR322分子中有单个EcoRI限制酶作用位点,EcoRl只能识别序列—GAATTC一,并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRl的切点,请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端                  

(4)pBR322分子中另有单个的BamHI限制酶作用位点,现将经BamHI处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因,通过DNA连接酶作用恢复         ,成功获得了重组质粒。说明                        

(5)为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌,将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图二的菌落;再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是            。图三结果显示,多数大肠杆菌导入的是                

据英国《每日邮报》2008年11月4日报道,日本一科学家从2只低温冷冻16年的正常死亡雄性实验鼠的脑组织中提取细胞核,并通过核移植技术得到克隆胚胎。在得到了克隆胚胎之后,科学家从中提取、培养出许多胚胎干细胞,然后利用这些胚胎干细胞,进行了二次核移植,最终获得2只健康的克隆鼠,其与正常鼠交配后还产下了健康的后代。

请回答:

(1)下面是某同学绘制的利用冷冻鼠脑细胞获得克隆胚胎的流程图:

图中①过程中,核中的基因种类是否发生变化?                 ;在克隆胚胎培育过程中除涉及动物体细胞核移植技术外,还涉及哪些现代生物技术?                   

(2)利用克隆胚胎培养获得的胚胎干细胞,其在功能上的特点是                

(3)二次核移植获得的两只健康鼠的性别均为雄性,这一结果表明克隆技术在畜牧业生产上可以用于                    

(4)选择合适的克隆胚胎移植时机是克隆鼠获得的关键之一,如小鼠等实验动物需要在囊胚以前,这种选择的主要依据是                   

(5)冷冻细胞克隆动物成果引发了人们复活古代动物的遐想,请从生物技术安全性或伦理问题方面谈谈你对这项技术的看法。

                                                             (至少写3项)。

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