下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
| 限制酶 | BamH Ⅰ | Hind Ⅲ | EcoR Ⅰ | Sma Ⅰ |
| 识别序列 及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
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(1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的Sma Ⅰ酶切位点越多,质粒的热稳定性越______。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是________________________________。
(4)与只使用EcoR Ⅰ相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______________________________。
(5) 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________。
(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在__________________________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程的有关内容,你认为有几处是不正确的
| 植物细胞工程 | 动物细胞工程 | |
| 技术手段 | 植物组织培养植物体细胞杂交 | 动物细胞培养和融合单克隆抗体的制备等 |
| 特殊处理 | 机械法去除细胞壁 | 胰蛋白酶处理、制细胞悬浮液 |
| 融合方法 | 物理方法、化学方法 | 物理方法、化学方法、生物方法 |
| 典型应用 | 人工种子;杂种植物 | 单克隆抗体的制备 |
| 培养液区别 | 蔗糖是离体组织赖以生长的成分 | 动物血清不可缺少 |