【题目】基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径,下图为研究人员培育转花叶病毒外壳蛋白基 因(CMV-CP基因,长度为740个碱基对)番茄的主要过程示意图(Kanr为卡那霉素抗性基因)。请回答:
(1)将CMV-CP基因导入番茄细胞后,培育的番茄植株具有抗CMV感染能力,这种现象属于植物的特异性免疫,该免疫过程中抗原是____。
(2)过程①接种的农杆菌细胞中,Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部,这是由于 __。使用液体培养基培养农杆菌的目的是____。
(3)为确定用于筛选的Kan适宜浓度,研究人员进行实验,结果如右表。最终确定过程③④加入的Kan浓度为35mg·L-1,该浓度既可___,又不至于因Kan浓度过高影响导入重组DNA细胞的生长发育。
Kan浓度/mg.L-1 | 接种外植体数 | 形成愈伤组织数 | 外植体状况 |
0 | 55 | 49 | 正常形成愈伤组织 |
25 | 66 | 2 | 只膨大、不易形成愈伤组织 |
35 | 66 | 0 | 变褐色死亡 |
50 | 64 | 0 | 变褐色死亡 |
(4)过程③、④所需的培养基为 __(填“固体”或“液体”)培养基。过程⑤再生植株抗性鉴定时,引物序列设计的主要依据是_____,引物序列长度及G+C比例直接影响着PCR过程中_______(填“变性”或“退火”或“延伸”)的温度。
(5)过程⑤电泳结果如图,其中l号为标准参照,2号为重组Ti质粒的PCR产物,3-6号为抗性植株DNA的PCR产物,可以确定3—6号再生植株中 ____号植株基因组中整合了CMV-CP基因。