【题目】新型冠状病毒是一种单链 RNA 病毒,新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光 PCR 鉴定。

1)首先,从样本中提取病毒RNA,经_____酶作用生成cDNA。然后以cDNA为模板 进行实时荧光PCR扩增,测定样品中病毒核酸量。

2)通过实时荧光PCR扩增目的基因,需额外添加荧光标记探针(一小段单链DNA,可与目的基因中部序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解,RQ分离后,R发出的荧光可被检测到(如图 1)。

当样本中有目的基因时,引物和探针与目的基因退火,通过形成_____而特异性结合。

PCR 循环的_____阶段,TaqDNA 聚合酶催化子链的合成并水解探针。检测到的荧光强

3)在通过实时荧光 PCR 检测新型冠状病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图 2 所示。

与指数增长期相比,线性增长期目的基因数量的增长率下降,原因有_____

② Ct 值的含义:在 PCR 扩增过程中,每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此,当样本中初始模板越多时,Ct 值就_____

某新型冠状病毒核酸检测说明书标明,Ct≤37 判定为阳性,Ct>40 或无 Ct 值判定为阴性。图 2 所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为_____

4)阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有_____

a.取样太早,样本中病毒量少,达不到实时荧光 PCR 检测阈值

b.样本被污染,RNA酶将病毒RNA降解

c.病毒发生变异

【题目】禾谷镰刀菌可侵染小麦等作物,使其产量和品质下降。研究者通过构建融合基因 Ve-FG 并转化拟南芥,以期实现转基因植物抗禾谷镰刀菌的目的。

1)利用 PCR 技术,将野生番茄的抗黄萎病基因 Ve 与禾谷镰刀菌的识别基因 FG 进行重组,构建融合基因 Ve-FG(如图 1)。

设计 3 对引物。其中引物 2 的一部分序列与 C 片段一部分序列互补,另一部分序列与_____片段一部分序列互补。

通过 PCR 分别克隆ACP 片段。克隆 A 片段应选用的引物是_____

ACP 片段为_____进行延伸,将 APC 片段拼接,再以引物 14 进行 PCR,扩增融合基因 Ve-FG

2)用_____ Ve-FG 与质粒连接,构建重组质粒(如图 2,图中潮霉素抗性基因只在植物细胞中表达)。将农杆菌与重组质粒混合,一段时间后涂布到含有_____的平板培养基上进行筛选。用含重组质粒的农杆菌转化拟南芥,几周后收获种子,种在含有潮霉素的培养基上,获得转基因拟南芥株系 1 和株系 2

3)分别提取株系 1 2、非转基因拟南芥植株叶片中的 DNA 作为模板,PCR 扩增 Ve-FG 基因后进行电泳,结果如图 3

电泳时应以_____为阳性对照。

成功导入 Ve-FG 基因的是_____

株系 1 可抗潮霉素,但电泳结果无阳性条带,原因可能是_____

4)为检验融合基因 Ve-FG 的功能,以导入 Ve-FG 基因的植株为实验组,导入空白质粒的植株为对照组,分别接种_____。一段时间后观察发现,与对照植株相比,实验组整体长势更旺盛,叶片萎蔫程度、叶片变黄程度也较轻,这表明_____

【题目】对普通动物使用高糖高脂饲料饲喂 4 周后,静脉注射 30%链脲佐菌素,可使其胰岛 β 细胞受损,诱导糖尿病的产生。科学家采取干细胞移植的方法,使移植的干细胞在糖尿病动物体内分化形成胰岛β 细胞,治疗这种类型的糖尿病。为验证这一治疗方案的可行性,某同学提出了以下实验思路,请利用相关实验材料,完善此实验方案。

实验材料:9 只健康的大鼠、高糖高脂饲料、普通饲料、30%链脲佐菌素、干细胞悬液、生理盐水、注射器、血糖测定仪。(要求与说明:具体操作不作要求;实验条件适宜)

1)实验思路与处理:

①将 9 只健康的大鼠随机均分为甲、乙、丙三组。

②分组处理情况:_________________________________________________

③一段时间后,____________________________________________________

④分组处理情况:________________________________________________________

⑤每隔一段时间,____________________________________

2)预测实验结果(以坐标曲线图形式表示实验结果,其中横坐标为处理时间)_________________________________

3)分析与讨论:

①实验中采用干细胞移植的方法治疗糖尿病大鼠时,为追踪干细胞成活、分化等情况,研究人员设计了如下方法:选用正常雄性大鼠作供体,将干细胞移植到雌性糖尿病大鼠体内, 干细胞的_________可作为追踪的标记物。

②环孢霉素A 是一种免疫抑制药物,注射环孢霉素 A 可提高移植的成功率,这说明环孢霉素A主要通过抑制______________细胞的功能来发挥作用。

 0  169444  169452  169458  169462  169468  169470  169474  169480  169482  169488  169494  169498  169500  169504  169510  169512  169518  169522  169524  169528  169530  169534  169536  169538  169539  169540  169542  169543  169544  169546  169548  169552  169554  169558  169560  169564  169570  169572  169578  169582  169584  169588  169594  169600  169602  169608  169612  169614  169620  169624  169630  169638  170175 

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