[题目]水稻 R 基因的等位基因 R1与 R2 存在一个碱基对的差异.为检测水稻的基因型.使用存在 1 个碱基错配的引物对 3 株水稻的 R 基因局部进行 PCR 扩增后.用限制酶 HinfⅠ切割并电——青夏教育精英家教网—

【题目】水稻 R 基因的等位基因 R1与 R2 存在一个碱基对的差异，为检测水稻的基因型，使用存在 1 个碱基错配的引物对 3 株水稻的 R 基因局部进行 PCR 扩增后，用限制酶 HinfⅠ切割并电泳（如下图）。下列相关叙述错误的是（）

A.在 R1基因和 R2基因的差异序列中，不含限制酶 HinfⅠ的酶切位点

B.引物中存在 1 个碱基错配，导致 R 基因经 PCR 扩增后 1 个碱基对改变

C.扩增后的R2片段有 1 个 HinfⅠ的酶切位点，而扩增后的 R1 片段没有

D.电泳结果显示，植株 1 为纯合子，植株 2 和植株 3 为杂合子

【题目】胚胎干细胞的发育和自我更新受多个基因调控（如下图）。下列有关胚胎干细胞的叙述错误的是（）

A.可分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞

B.将干细胞用于疾病的临床治疗没有任何风险

C.Nanog 基因突变可能使胚胎干细胞自我更新受阻

D.抑制 Oct3/4表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化

【题目】回答下列（一）、（二）小题：

（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：

（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入一些雪“陈泡菜汁”，这相当于加入了一些经过___________的发酵菌种；还可以采取用热水短时间浸泡蔬菜的手段，此项措施能缩短发酵时间的原因是___________________________________________________。

（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由假丝酵母进行________________ 呼吸产生的。腌制过程需要控制时间、温度和食盐的用量。食盐过量会导致“咸而不酸”，原因是_____________。

（3）家庭制作泡菜过程并没有实行严格的无菌操作就能成功，请解释原因？_____________________________________ 。

（4）亚硝酸盐对人体有害，而它在泡菜的腌制过程中有先增后减的变化规律，所以需要测定其含量来确定泡菜的可食用时间，通常应用光电比色法进行亚硝酸盐的定量。泡菜样品处理环节加硫酸锌是为了_____________________；氢氧化钠用来________________；样品测定时加 60%乙酸创设了显色反应所需要的酸性环境；样品及亚硝酸盐标准溶液加显色剂后需要_____________________________25min，使用相同光程的比色杯在 550nm 光波条件下测 OD 值。

（二）回答与基因工程和生物克隆有关的问题：

MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是 GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切点。图 3 表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图 4 表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。

（1）若要用如图 1 和图 2 中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用___________、DNA 连接酶和DNA 聚合酶等工具酶。

（2）图 3 中的转基因羊通常被称为生物反应器，它基于基因工程技术，将外援基因导入其基因组并_______________，生产价格低廉的蛋白质药物，具有光明的发展前景。导入受体细胞B 常用方法是_________， ④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C 首先使用Ca2+处理使其吸收周围的 DNA 分子，之后将细胞 C 与图中 M 溶于_________中，完成转化过程。