【题目】研究发现物质X与肝细胞膜上Y蛋白结合可促进某动物肝脏细胞的增殖,请设计相应的实验方案验证该发现。

实验材料:正常肝脏细胞、Y蛋白基因敲除的肝脏细胞(Y蛋白基因敲除的肝脏细胞增殖能力有所降低)、X物质溶液、培养液,比浊计及实验所需其他试剂和材料。(说明:答题时不考虑加入X后的体积变化等误差,XY蛋白不结合时对细胞无影响。提供的细胞均具有分裂能力,只进行原代培养且培养条件适宜,比浊计使用方法不做要求)

1)实验思路:

①取培养瓶若干个,分组并编号如下:_____________。每组设置若干个重复样品。培养12小时后,其中在AB两组中加入等量的物质X

②各组样品在CO2培养箱中培养,每隔6小时各取其中的几个样品,用比浊计测定________并记录数据。由于细胞培养时细胞__________难以形成细胞悬液,所以需加入胰蛋白酶并摇匀后再测定。

24小时后结束实验统计分析数据,并以此数据为纵坐标绘制曲线。

2)请用曲线图预测实验结果:______________

3)欲进一步研究细胞膜上Y蛋白与X物质的结合会受到Z 物质的干扰(而Z本身不影响细胞增殖),则在原实验基础上需增设的实验组是____________

4)分析与讨论:

a.经过研究发现物质X不能促进该动物成骨细胞的增殖,而成骨细胞溶胶中有YmRNA,则物质X不能促进成骨细胞增殖的原因可能是__________________________。成骨细胞表面蛋白质多种多样的根本原因是_______________________

b.欲确定Y 蛋白基因所在的染色体,可在细胞水平上用______________技术来进行基因定位。

【题目】急性胰腺炎(acute pancreatitisAP)患者的胰腺组织,由于自身消化、水肿、出血甚至会坏死,所以具有很高的致病率与致死率。以往研究成果发现细胞自噬是引起急性胰腺炎的主要原因。在前期实验中发现AP的细胞中MasⅠ基因表达量异常,故推测该基因表达量的变化可能对AP细胞自噬有影响。为证明这一推测,科研人员做了如下实验。请据此回答:

1)取小鼠胰腺的组织,剪碎、并用_____处理,使细胞分散以便进行_____代培养。与植物组织培养相比,培养动物细胞的培养基中不需要添加_________等物质,这样可以模拟动物细胞在体内的环境。

2)已知雨蛙素(CAE)可以诱导细胞自噬。一些小分子RNAsiRNA)可以特异性的降解同源mRNA,从而抑制特定基因的表达。通过DNA重组技术导入特定的基因可以使细胞中该的基因表达量提高。下表显示了部分实验处理方法,“+”表示施加处理,“-”表示不施加处理,请在①②③后面的横线处填“+”或“-”,以完善实验方案:

处理方法

A

B

C

D

加入雨蛙素

-

+

+

导入 Mas-siRNA

-

-

+

导入 MasⅠ基因

-

-

+

处理①_____;处理②________;处理③_____

3)细胞中的LC3蛋白表达量同细胞自噬程度呈正相关,可以使用_____法检测细胞中LC3的表达量,用以反映细胞自噬的情况。实验结果如图所示:

注:图中红色荧光的分布范围和亮度与LC3蛋白的表达量呈正相关

分析实验结果可知,与MasⅠ基因低表达组相比,高表达组细胞自噬现象_____。由此提示,若能_________________________________________,则有利于保护AP细胞。

 0  169411  169419  169425  169429  169435  169437  169441  169447  169449  169455  169461  169465  169467  169471  169477  169479  169485  169489  169491  169495  169497  169501  169503  169505  169506  169507  169509  169510  169511  169513  169515  169519  169521  169525  169527  169531  169537  169539  169545  169549  169551  169555  169561  169567  169569  169575  169579  169581  169587  169591  169597  169605  170175 

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