【题目】急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者的胰腺组织,由于自身消化、水肿、出血甚至会坏死,所以具有很高的致病率与致死率。以往研究成果发现细胞自噬是引起急性胰腺炎的主要原因。在前期实验中发现AP的细胞中MasⅠ基因表达量异常,故推测该基因表达量的变化可能对AP细胞自噬有影响。为证明这一推测,科研人员做了如下实验。请据此回答:
(1)取小鼠胰腺的组织,剪碎、并用_____处理,使细胞分散以便进行_____代培养。与植物组织培养相比,培养动物细胞的培养基中不需要添加_________等物质,这样可以模拟动物细胞在体内的环境。
(2)已知雨蛙素(CAE)可以诱导细胞自噬。一些小分子RNA(siRNA)可以特异性的降解同源mRNA,从而抑制特定基因的表达。通过DNA重组技术导入特定的基因可以使细胞中该的基因表达量提高。下表显示了部分实验处理方法,“+”表示施加处理,“-”表示不施加处理,请在①②③后面的横线处填“+”或“-”,以完善实验方案:
处理方法 | A 组 | B组 | C组 | D组 |
加入雨蛙素 | - | + | ① | + |
导入 MasⅠ-siRNA | - | - | + | ② |
导入 MasⅠ基因 | - | - | ③ | + |
处理①_____;处理②________;处理③_____。
(3)细胞中的LC3蛋白表达量同细胞自噬程度呈正相关,可以使用_____法检测细胞中LC3的表达量,用以反映细胞自噬的情况。实验结果如图所示:
注:图中红色荧光的分布范围和亮度与LC3蛋白的表达量呈正相关
分析实验结果可知,与MasⅠ基因低表达组相比,高表达组细胞自噬现象_____。由此提示,若能_________________________________________,则有利于保护AP细胞。