乙病遗传情况调查

注:每类家庭人数近200人。表中:“+”为发现乙病症表现者，“-”为正常表现者

（1）据图分析，甲病的遗传方式为__________，判断乙病的遗传方式要根据系谱图及表中的__________类家庭。Ⅲ3 的两对等位基因均为杂合的概率为_________。

（2）若Ⅳ1 与一个正常男性结婚，则他们生一个只患乙病男孩的概率是__________。若Ⅳ4 与一个正常女性结婚，则他们生一个表现型正常的女孩，她是甲病基因携带者的概率__________。

（3）下列属于遗传咨询范畴的有__________。

A．详细了解家庭病史 B．推算后代遗传病的再发风险率C．对胎儿进行基因诊断 D．提出防治对策和建议

（4）若Ⅰ1 同时患线粒体肌病（由线粒体 DNA 异常所致），则Ⅱ2、Ⅱ3__________（填“均患该病”、“ 均不患该病”或“无法确定”）。若Ⅲ2 同时患克氏综合征，其性染色体为 XXY，其两条 X 染色体分别来自外祖父和外祖母，说明Ⅲ2 患克氏综合征的原因是__________。

（5）若乙病遗传情况调查中共调查 1000 人（其中男 500 人，女 500 人），调查结果发现患者25 人（其中男 20 人，女 5 人），如果在该人群中还有 15 个携带者，则 b 基因的频率是__________。

注：neor 是新霉素抗性基因；tk 基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。

（1）将目的基因和与细胞内靶基因同源的 DNA 片段都重组到__________上，构建打靶载体（基因表达载体）。

（2）打靶载体测序验证正确后，利用__________酶，将之线性化，以提高重组率。通过__________技术将打靶载体导入胚胎干细胞，这样打靶载体和与细胞内靶基因同源的区段就有机会发生同源重组。

（3）为了筛选发生同源重组的细胞，可在培养液中加入__________。最后还需要通过__________技术鉴定同源重组的细胞（去除靶基因），将这样的细胞通过动物细胞培养后，获得大量打靶成功的细胞。其中， 暂时不用的细胞进行__________保存。

（4）将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚，移植到同种、__________的母鼠体内，一段时间后对受体母鼠进行妊娠检查，确保其生下嵌合体小鼠。这种嵌合体小鼠长大后，体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的__________（填“体细胞”或“生殖细胞”）恰巧被“修饰”过了，则它们的杂交后代中，就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。

A.酵母菌细胞中既有有氧呼吸酶也有无氧呼吸酶

B.果酒发酵装置中，排气口要和一个长而弯曲的胶管连接来防止杂菌污染

C.醋酸菌能在有氧条件下将果酒变成果醋，也可以在无氧条件下将葡萄糖变成果醋

D.果酒发酵时温度应控制在18～25℃，果醋发酵时温度应控制在30～35℃

A. B. C. D.

A.吞噬细胞和T细胞都能特异性识别抗原

B.吞噬细胞具有摄取处理和传递抗原的作用

C.若图示表示细胞免疫，则T细胞将进行增殖分化

D.若图示表示体液免疫，则T细胞将分泌淋巴因子

（1）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不 分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的_____，加入抗生素是为了_____。该过程对于研究 细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。

（2）过程Ⅱ将带有遗传标记的 ES 细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有_______的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是____。囊胚不断的扩大，从中伸展出的过程称为___。

（3）过程Ⅲ是培育转基因小鼠，将获得的目的基因导入胚胎干细胞之前需构建基因表达载体，目的是_________________。将构建好的表达载体导入胚胎干细胞最常用的方法是____。

（4）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须去除小鼠的胸腺， 使其存在免疫缺陷，其目的是________，该过程研究的意义在于解决____问题。

（5）该研究中，包含的生物技术有____________(至少写出 4 种)。

（1）图示方法是____技术的应用，该技术的基础是____技术。

（2）操作所用的成纤维细胞应传代____代以内，诱导融合时需要加入的化学促融剂是____。

（3）人、鼠细胞先经过细胞融合形成________，再经过一次____，形成单核细胞。

（4）HAT培养基起____培养作用，培养时温度应为____℃ ，操作中加入鸟本苷的目的是_____。

A.用 EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体

B.用 BglⅡ和 EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体

C.用 BglⅡ和 Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体

D.用 EcoRⅠ和 Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体

A. 单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的

B. 活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程

C. 在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹

D. 单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害

（1）重组质粒中终止子的作用是 ____________________。表中切割 DNA 后形成相同黏性末端的限制性内切酶是__________________，黏性末端为___________ 。

（2）过程③使用的限制性内切酶是 _________________。过程⑤需先用 LiAc 处理酿酒酵母细胞，其目的是 _________________________________ ，使细胞处于能吸收环境中DNA的状态。

（3）结合图示分析，进行工程菌筛选时，在含四环素的培养基上长出的菌落不一定是导入重组质粒的酿酒酵母，这是因为 _____________________________________ 。

（4）研究人员对筛选得到的两种重组酵母(甲中导入启动子 A，乙中导入启动子 B)细胞中木酮糖激酶活力及发酵乙醇得率进行比较(发酵条件：1 L 15 g·L－1 的葡萄糖和 50 g·L－1 的木糖培养基中，120 h)结果如下表。

从木酮糖激酶酶活力分析，可以得出的结论是启动子 A 的功能比启动子B____，但本实验中乙醇得率相差不大，其可能的原因是____。