【题目】Ⅰ.为研究肝癌致病机理,利用下图所示方法和基因工程获取相关癌基因以进一步研究。

(1)上图中,A过程需要用__________酶,D过程需要回收__________(未杂交/杂交分子)的含32P的cDNA单链,继而通过人工合成,获得__________,并用其构建基因文库。
Ⅱ.某些植物在进化过程中已经形成抵抗干旱、低温和高盐等逆境的调控机制,感受并响应各种外界刺激。转录因子OrERF是一类蛋白质,在植物抵抗逆境时发挥重要作用。科研人员对水稻OrERF基因进行系列研究。
(2)科研人员欲将水稻OrER基因导入拟南芥体内,获得抗逆性强的植株,设计的实验方案如下图:

①可利用__________技术获得并扩增此基因。如果开始的OrERF基因只有一个,第n次循环需要引物__________对。
②OrERF基因需插入Ti质粒的T-DNA片段中,原因是____________________。
③上图中d阶段需要应用__________技术,为提高实验的成功率,其培养基中除加入必须的营养物质、植物激素和琼脂外,还需添加____________________。

(3)实验检测某转基因拟南芥植株中OrERF基因在高盐条件下的表达水平,结果如右图。实验结果表明,高盐处理后___________小时OrERF基因的表达显著增加。
(4)植物感受外界干旱、高盐、低温等信号,通过一系列信息传递合成转录因子。转录因子OrERF对下游基因调节过程如图,其通过__________,启动转录的过程。最后通过基因产物的作用对外界信号在生理生化等方面作出适合的调节反应。
