【题目】苯丙酮尿症是由于患者PKU基因突变引起体细胞中缺少一种酶,致使体内的苯丙氨酸代谢异常转化为苯丙酮酸,从而导致患者神经系统损害。将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上来替换突变基因,可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是:从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1HB2,根据其碱基序列分别合成HB1HB2,再将两者分别与基因K1K2连接,中间插入正常PKU基因和标记基因neor,构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1HB2序列发生交换,导致两者之间区域发生互换,如图所示。回答下列问题:

1)上图中通过基因定点整合可替换特定基因,该技术可用于单基因遗传病的治疗,该技术的应用原理属于________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠,除了胚胎干细胞能大量增殖外,还因为胚胎干细胞________

2)实验中小鼠胚胎发育到囊胚期时,聚集在胚胎一端,个体较大的细胞是______________,可将其取出并分散成单个细胞进行培养,将来可为实验提供所需的胚胎干细胞。培养过程中培养液除了一些无机盐和有机盐外,还需要添加两酸、两素以及动物血清,其中的两酸是指________,培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为________

3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时,会出现PKU基因错误整合。错误整合时,载体的两个K基因中至少会有一个与neor一起整合到染色体DNA上。已知含有neor的细胞具有G418的抗性。 K1K2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418DHPG的培养液中进行培养,在双重选择下存活下来的是________的胚胎干细胞,理由是____________________________

4 将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠,从个体生物学水平检测,若小鼠尿液中________,说明PKU基因成功表达。

【题目】对硝基苯酚(pNitrophenolPNP)属于硝基苯酚类化合物(水溶液为黄色),主要来源于农药、医药、染料、塑料等生产企业的排放,对植物、微生物、动物均有毒性。某研学小组从活性污泥中分离到一株PNP降解菌,对其形态、生理生化及降解特性进行研究。回答下列问题:

1)取采自污水处理厂的活性污泥转接至富集培养液中,培养液配方如下表:

NH4NO3

酵母膏

KH2PO4

K2HPO4

NaCl

MgSO4·7H2O

FeSO4

PNP

蒸馏水

pH

1 g

05 g

05 g

15 g

1 g

01 g

0025 g

01 g

1 L

70

该培养液________(填“是”或“不是”)以PNP为唯一碳源,富集过程中连续转接至新鲜的富集培养液中5次,该步骤的目的是______________________________

2)将富集液进行梯度稀释,取适量稀释菌液在LB固体培养基上利用稀释涂布平板法进行分离,需要用到下图中的实验器材有________。在培养过程中,需放置________培养基一起培养,来检验培养基是否受到污染。

3)挑取LB培养基上的单菌落转接到300 mg/L PNP的固体培养基上,按功能划分,该培养基属于________培养基;以菌落周围产生________作为筛选标记,最终得到一株降解能力较强的降解菌,命名为P62

4)下图是探究环境因素影响P62降解效果的实验数据。据图1分析,当温度在30 ℃左右时,P62的降解效果较好,推测可能的原因是________。据图2分析,在250 mL锥形瓶中的装液量为180 mL时,会明显抑制降解效果,推测________对降解效果影响较大。

 0  169255  169263  169269  169273  169279  169281  169285  169291  169293  169299  169305  169309  169311  169315  169321  169323  169329  169333  169335  169339  169341  169345  169347  169349  169350  169351  169353  169354  169355  169357  169359  169363  169365  169369  169371  169375  169381  169383  169389  169393  169395  169399  169405  169411  169413  169419  169423  169425  169431  169435  169441  169449  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网