【题目】抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白,临床上主要用于血液性疾病的治疗。凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。下列是生产这两种酶的相关思路,请回答下列问题:

1)图1为通过培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。

①图中过程a指的是利用___________法将抗凝血酶Ⅲ蛋白基因导入受精卵。受体细胞不选用体细胞的理由是______________________

b为早期胚胎培养和胚胎移植,在胚胎移植前,需进行___________,目的是确定要培育的个体能产牛奶。

③可采用抗原-抗体杂交法来鉴定转基因牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白。该方法需要使用抗凝血酶Ⅲ蛋白的单克隆抗体,请写出制备该抗体的实验思路___________

2)从牛胃液中分离得到的凝乳酶以其催化能力強而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。

①从牛胃细胞中提取mRNA,再通过___________形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR扩增目的基因,有肘需要在引物的5’端设计___________(填“限制酶”/“DNA连接酶”/“RNA聚合酶”)的识别序列,以便构建重组DNA分子。

②为提高重组DNA分子的比例,在构建重组DNA分子(如图2所示)时最好选用___________作限制酶。

③经研究发现,如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸,则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶,应直接改造的是___________(凝乳酶蛋白/凝乳酶mRNA/凝乳酶基因)。

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