【题目】为了提高马铃薯对真菌病害的抗性,某科研小组进行了马铃薯转基因抗病育种的初步研究,其过程如下所示,请将其完善:

1)从生防木霉菌株中提取总RNA以及通过____________过程合成cDNA

2)利用PCR技术对目的基因Chi(抗菌基因)进行扩增:PCR产物与PMDTM18-T载体连接,转化到大肠杆菌,获得重组质粒PMDTM18-T-Chi

3)植物表达载体的构建(如图所示):将重组质粒PMDTM18-T-Chip33ECR质粒用____________(填具体酶)进行酶切,再用T4 DNA连接酶连接,得到p33ECR-Chi。此过程中一般会使用高浓度的TDNA连接酶,T4 DNA连接酶的作用是______________________。表达载体中p35S___________(填序号)识别和结合的部位。

DNA聚合酶 DNA连接酶

③限制酶 RNA聚合酶

4p33ECR-Chi工程菌的获得:将p33ECR-Chi质粒转化至农杆菌菌株中,在含_____________的培养基上获得白色菌斑,挑菌落,获得工程菌。

5)转基因植株的获得:通过农杆菌转化法将Chi基因转化到马铃薯栽培品种试管马铃薯的块茎中。试管马铃薯的块茎是马铃薯遗传转化的理想外植体,分析其具有的优点是_________________(填序号)

①周期长 ②取材方便 ③无需灭菌 ④转化效率高

6)对马铃薯进行抗菌检测:从分子水平上可采用_____________法检测目的基因表达的产物;从个体水平上进行检测的操作是_______________________

【题目】水产或家畜养殖污水中含有大量的类固醇,而这类化合物会对人体造成危害,且不易被降解,而丛毛单胞菌是日前用于降解这类有机污染物常用的需氧型菌种。由于抗生素的滥用,污水中含有大量的抗生素残余,这些抗生素会强烈地抑制丛毛单胞菌的作用,从而降低污水处理的效果。结合所学知识,回答下列问题:

1)从自然界中分离出能够降解类固醇化合物的丛毛单胞菌时,一般会从鱼塘废水或附近土壤进行取样,其原因是___________________________________________________________

2)筛选丛毛单胞菌时,通常以________________为唯一碳源的选择培养基进行筛选。制备这一培养基的一般步骤包括计算、称量,溶化、______________、倒平板。

3)研究人员从含抗生素的污水中分离出了3个抗生素耐药型丛毛单胞菌菌株(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)为了测试其在高浓度抗生素条件下的增殖能力,他们进行了如下实验:

①将等量的三种菌株,分别接种到添加了高浓度抗生素和一定量类固醇物质的细菌液体培养基中,测量计算初始培养液中种群密度的相对值,之后不断通入无菌空气,在适宜的条件下进行培养;

②接种培养开始后100小时内,每20小时取样一次,每次每种菌株重复3次计数,常利用_______________法接种进行活菌数的测定,从初始到实验结束,实验过程中需测定计数的样品次数为____________。在测定菌群密度相对值的同时,每次取样还要测定菌液中固醇类物质的浓度。

③下面的曲线图是根据实验过程中所获得的数据绘制而成。

a.与菌株Ⅱ、Ⅲ相比,实验进行到60小时左右时,造成菌株I种群密度下降的原因有______________(填序号)。

①种内斗争加剧 ②营养物质积累

③营养物质消耗 ④代谢废物消耗

b.从污水处理的角度分析及研究数据来看,菌株____________更适合作为污水中类固醇污染物的处理,理由是___________________________________________________________________________

 0  169022  169030  169036  169040  169046  169048  169052  169058  169060  169066  169072  169076  169078  169082  169088  169090  169096  169100  169102  169106  169108  169112  169114  169116  169117  169118  169120  169121  169122  169124  169126  169130  169132  169136  169138  169142  169148  169150  169156  169160  169162  169166  169172  169178  169180  169186  169190  169192  169198  169202  169208  169216  170175 

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