【题目】回答下列(一)、(二)小题

(一)研究小组从土壤中分离胞外脲酶高产菌株的过程如下:

1)尿素固体培养基的配制:将葡萄糖、NaCIK2HPO4、酚红、水和凝固剂___________按配方配置好_________,加入三角瓶并用封口膜封口后用__________法灭菌。待冷却至60℃时,加入经____处理的尿素溶液,摇动,混匀后倒平板。

2)从___________环境中采集土样,用无菌水等梯度稀释,接种到平板。培养皿在37℃恒温培养箱中倒置培养24h后,用接种环挑选___________的菌落,接种到液体培养基中,并震荡培养48h

3)将培养液离心,取___________测定脲酶活性。得到的脲酶可用图___________法固定化以利于连续使用。

(二)拟利用转基因技术将北极海鱼的抗冻基因转入番茄,以提高番茄的抗冻能力,请回答:

1)将含抗冻基因的DNA和农杆菌的___________用相应的限制性核酸内切酶切割,形成___________,再用DNA连接酶连接获得重组质粒。

2)将重组质粒与经___________处理的农杆菌在离心管中混合,在离心管中加入液体培养基,置于___________中慢速培养一段时间,使农杆菌恢复正常状态。选用的农杆菌应是限制性核酸内切酶缺陷型菌株,原因是_________________________________

3)用农杆菌转化法获得含抗冻基因的番茄细胞后,经脱分化形成愈伤组织,再通过调节培养基中的___________诱导再生出新植株。

4)请简要描述个体水平检测转基因番茄是否成功表达的实验思路:______________________

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