【题目】近期,以武汉地区为中心爆发了新型冠状病毒(2019-nCoV)病例,该病毒是具外套膜的正链单股RNA病毒。目前,对于该病毒的检测手段主要为利用荧光PCR试剂盒对其核酸进行检测。其原理是,通过提取病人样本中的RNA,进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR,即先通过逆转录获得cDNA,然后以其为模板进行PCR),通过扩增反应将样本中微量的病毒信息加以放大,最后以荧光的方式读取信号。如果PCR之后信号为阳性,那么就可说样本中存在着病毒(已经感染),反之则说明没有感染。

1PCR扩增时在加入一对引物的同时还需加入一个特异性的荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团。如上图所示,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;Taq酶在催化子链延伸时,还具有外切酶活性,它可以沿着____________(填“5→3'”或“3→5'”)方向将探针酶切降解,使报告基团和淬灭基团分离。于是,随着DNA扩增次数的增加,荧光的强度会逐渐____________(填“增大”或“减小”),从而实现了荧光信号的变化与PCR产物的形成完全同步。

2)目前2019-nCoV的全基因组序列测定已完成,这有利于我们在研发病毒核酸检测试剂盒时根据其基因组序列来设计___________

3)此外,对新型冠状病毒感染的诊断还可以通过抗体检测,这需要利用动物细胞工程中的__________技术,其优点为______________

4)为了预防、控制该病的发生、流行,科学人员正在紧急研发相应的疫苗,其中利用灭活的病毒制备的疫苗称为灭活疫苗,这里的“灭活”是指利用物理或化学手段使病毒失去_________,但是并不破坏病原体的_________。此外,还可以利用___________技术来表达抗原蛋白,以大规模生产疫苗。

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