【题目】基因表达载体的构建是基因工程的重要技术。下图甲表示以大肠杆菌为受体细胞的基因表达载体的构建过程,请回答以下问题:
(1)质粒中的复制原点是________________酶识别和结合的位点。
(2)体外重组的质粒可通过_______离子参与的________方法导入大肠杆菌细胞
(3)为了筛选获得含有上图所示重组质粒的大肠杆菌,实验人员首先将经转化处理过的大肠杆菌接种在含_____________(抗生素)的培养基中,并出现菌落(图乙),然后用灭菌后的丝绒包上棉花制成的一枚“印章”,将图乙所示培养基上的菌落印到含__________(抗生素)的另一培养基上,培养后形成菌落(图丙)。图丙中,________(填能正常生长繁殖或不能正常生长繁殖)的菌落已导入含目的基因的重组质粒。
(4)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体。而体外重组的噬菌体DNA通常需与________组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是________。噬菌体载体与质粒载体相比,其优点是__________________________________ 。
(5)1967年,罗思和海林斯基发现细菌染色体DNA之外的质粒有自我复制能力,并可以在细菌细胞之间转移,这一发现对于当时基因工程技术的发展有什么促进作用?__________________________________
(6)若某DNA分子片段用两种限制酶酶切成不同长度的片段(结果如下表所示)。
酶 | 酶切结果(1kb=1000对碱基) |
BamHI | 四个片段:8.0kb,7.5kb,4.5kb,2.9kb |
BglII | 三个片段:13kb,6kb,3.9kb |
BamHI+ BglII | 六个片段:7.5kb,6kb,3.5kb,2.9kb,2kb,1kb |
7.5kb、2.9kb和6kb三个片段中不存在BamHI和BglII两种酶的酶切位点,请根据上述酶切结果说明判断依据:_______________。