【题目】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
限制酶 | EcoR Ⅰ | BamH Ⅰ | Sau3AI | SmaⅠ |
识别序列及切割位点 |
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后,含有_______个游离的磷酸基团。
(2)根据限制酶识别和切割的位点,应选择_________________酶对质粒和含目的基因的外源DNA进行切割。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能用BamH Ⅰ切割,原因是____________________________________________。
(3)通过PCR技术扩增目的基因时,加入的引物有A、B两种,引物A、B序列设计的依据是_______________________,若该目的基因扩增4代,则需要消耗引物A____________个。
(4)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入DNA连接酶,若只考虑DNA切段两两连接,则混合物中将形成_______种环状DNA。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________________。
【题目】大量研究表明,CO2浓度升高造成温室效应的同时,也影响了绿色植物的生长发育。
(1)光合作用合成的有机物运输到根细胞,在____________中形成CO2和水,释放的能量转移到______________中,直接用于根的生长发育。
(2)科研人员研究了CO2浓度升高对拟南芥根系生长发育的影响。根尖每生长1 cm拍照一次,结果如图。据图可知,实验组根毛长度和密度均明显________________对照组。
(3)①为进一步探究CO2浓度升高对根细胞的影响, 获取相关处理下的非根毛区横切面,制作成临时装片,利用显微镜观察并计数,结果如下表:
组别 观测 指标处理 | 1组 | 2组 | 3组 | 4组 |
正常浓度CO2 | 高浓度CO2 | 正常浓度CO2+10NmNAA(生长素类似物) | 正常浓度CO2+5UmNPA(生长素运输阻断剂) | |
表皮细胞体积 | 大 | 小 | 小 | 大 |
表皮细胞总数 | 少 | 多 | 多 | 比1组少 |
生毛细胞数目 | 少 | 多 | 多 | 比1组少 |
②由表可知高浓度CO2增加了_____________________________;据1、2、3组结果推测高浓度CO2通过___________________影响根毛生长发育。
③据1、2、4组说明,高浓度CO2对根毛生长发育影响与____________________有关。
(4)为进一步验证上述推测,根尖每生长1cm测定生长素合成特异性启动基因表达情况,实验结果如图。综合上述实验,推测CO2浓度升高影响根毛生长发育的机制是____________________。
(5)研究表明,生长素通过细胞内信号分子进一步传递信息,增加根毛细胞尖端内部钙离子浓度,促进生毛细胞的根毛伸长生长。已知植物细胞有生长素受体、钙离子通道蛋白—钙调素复合体、钙离子通道蛋白、细胞内信号分子亚硝基化靶向蛋白等,请选用已知信息,提出生长素促进根毛伸长生长的一种可能机制。_____________________________。