【题目】研究发现,许多癌细胞表面会出现高亲和力的促性腺激素释放激素(LHRH)受体。某研究所构建了一种导向治疗癌症的药物——重组人促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A融合蛋白(LHRH-PE40),目前已完成临床前研究。
(1)促性腺激素释放激素(LHRH)由_______分泌,与相关垂体细胞膜表面的特异性__________结合并调节其细胞分泌促性腺激素,进而调节相关腺体的激素分泌,该过程体现了激素分泌的___________调节。
(2)绿脓杆菌外毒素A(PEA)是绿脓杆菌的主要毒力因子,它必须在进入细胞后才发挥毒性作用,杀死细胞。PEA有PEA受体结合区、越膜区和毒性区三个功能区。LHRH-PE40是利用基因工程的方法将LHRH基因和去除_____________区的所对应的基因片段在体外重组后,导入大肠杆菌表达产生的。
(3)为了研究LHRH-PE40与人结肠癌细胞膜蛋白特异性结合的最适加入量。科研人员用125I标记的LHRH-PE40和人结肠癌细胞膜蛋白进行结合实验。结果如下图所示。
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注:—▲—TB:125I-LHRH-PE40与癌细胞膜蛋白的总结合量
—■—NB:125I-LHRH-PE40与癌细胞膜蛋白的非特异性结合量(非特异性结合是指激素结合到受体蛋白除特异性结合位点之外的其它部位)。
据图分析可知125I _LHRH-PE40可作为其与人结肠癌细胞膜蛋白特异性结合的最适加入量是______万CPM,作出此判断的依据是____________________。
(4)为了进一步验证:“LHRH-PE40特异性结合的对象为LHRH受体”,科研人员以人结肠癌细胞膜蛋白作为实验材料,并先后添加相关药品进行实验。(注:药品A-D均溶于E)
A.125I-LHRH B.LHRH-PE40 C.LHRH D. LHRH受体 E.缓冲液
分组 | 先加药品 | 后加药品 | 测量指标 |
实验组 | 药品1 | 药品3 | 检测膜蛋白与药物结合后的放射性 |
对照组1 | E | ||
对照组2 | 药品2 |
①药品1、2、3分别是_______(填字母)。
②若实验结果为__________,则证明“LHRH-PE40特异性结合的对象为LHRH受体”的说法正确。
③若将LHRH-PE40作为治疗结肠癌的临床药物,需要补充的数据是______。
【题目】P115蛋白是高尔基体上重要的囊泡转运蛋白,与胃癌细胞增殖有关。为进一步确定P115与胃癌细胞增殖的关系,研究人员展开系列实验。
(1)与P115蛋白合成和加工密切相关的细胞器有____________和高尔基体,P115蛋白的______与其作用效果密切相关。
(2)分别收集100mg新鲜胃癌组织及正常胃粘膜组织,检测其中P115蛋白含量,两组相对值分别为0.75和0.35,由此推测胃癌细胞中__________________。进一步分别提取总RNA,测得P115的mRNA相对值分别为0.7和0.5,初步证实上述推测是合理的。
(3)为研究P115在胃癌细胞株增殖中的作用,研究人员构建了含有P115-shRNA的表达载体(P115-shRNA可使相应基因沉默),导入胃癌细胞株BGC-823,成功转染后检测各组P115蛋白含量,结果如下图。
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①上图中1、2组为对照组,1组不导入质粒,2组____________,3、4、5组分别导入含有P115-shRNA1、P115-shRNA2、P115-shRNA3的表达载体。
②β-actin是一种细胞骨架蛋白,可以在实验中作为参考标准的原因是____。
③选择上图中的第___组作为实验组,进一步测定不同培养时间各组细胞数量相对值,结果如下表。
分组 培养时间 | 1组 | 2组 | 实验组 |
0h | 0.285 | 0.283 | 0.284 |
24h | 0.453 | 0.454 | 0.384 |
48h | 0.675 | 0.678 | 0.466 |
72h | 0.981 | 0.991 | 0.605 |
此结果说明P115蛋白______________。
④测定上述第1、2组和实验组处于细胞周期各时期细胞数,结果如下图。
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由上图可知P115-shRNA通过__________来抑制胃癌细胞BGC-823增殖。
(4)结合上述研究,提出治疗胃癌的思路___________。