【题目】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割后,含有_________个游离的磷酸基团。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是_____________________

2)与只使用EcoR I相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于________________________________________________

3)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在_______________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。

4)下列有关限制酶的叙述正确的是__________________

A.从反应类型来看,限制酶催化的是一种水解反应

B.限制酶的活性受温度、pH的影响

C.一种限制酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列

D.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越小

若用限制酶AB单独或联合切割一个5000bpbp为碱基对)大小的线状DNA分子,相关实验及数据如下表。

第一步水解

产物(bp

第二步水解

产物(bp

实验1

A酶切割

2100

将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割

2001900

1400

600800

1000

1000

500

500

实验2

B酶切割

2500

将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割

1900600

1300

800500

1200

1000200

实验3

A酶、B酶同时切割

19001000800600500200

5)由单酶剪切的片段数可知,A酶和B酶的酶切位点分别为_______个和_______个。

6)综合实验数据的分析,在下图中绘制出实验3的酶切图谱。

_______________

(每小格代表100bp

 0  167384  167392  167398  167402  167408  167410  167414  167420  167422  167428  167434  167438  167440  167444  167450  167452  167458  167462  167464  167468  167470  167474  167476  167478  167479  167480  167482  167483  167484  167486  167488  167492  167494  167498  167500  167504  167510  167512  167518  167522  167524  167528  167534  167540  167542  167548  167552  167554  167560  167564  167570  167578  170175 

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