【题目】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.
限制酶 | MetⅠ | PstⅠ | EcoRⅠ | SmaⅠ | XmaⅠ |
识别序列及切割位点 |
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(1)若图3中目的基因D是人的α﹣抗胰蛋白酶的基因,现在要培养乳汁中含α﹣抗胰蛋白酶的羊,研究者需将该基因通过(______)方法注入到羊的_____中,则发育成的羊有可能分泌含α﹣抗胰蛋白酶的乳汁.这一过程涉及到以下哪些过程_____.
A.DNA自我复制 B.DNA以其一条链为模板合成RNA
C.RNA自我复制 D.按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
(2)限制酶SmaⅠ和XmaⅠ作用的不同点是_____。
(3)图3中的目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得,而图2所示的质粒无相应的限制酶酶切位点.所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶酶切位点.试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的过程(提供构建需要的所有条件):首先用_____处理质粒;然后用_____处理质粒,使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸;再用_____处理质粒,形成了的限制酶酶切割位点,它可被_____识别.则a~d处依次是__。
①EcoRⅠ②MetⅠ③PstⅠ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶
A.③④⑤②B.③⑤④①C.①⑤④②D.②④⑤③
(4)假设图2质粒上还有一个PstⅠ的识别序列,现用EcoRⅠ、PstⅠ单独或联合切割同一质粒,得到如下表的DNA长度片段.请在图中画3出质粒上EcoRⅠ和PstⅠ的切割位点.___
酶 | DNA片段长度(kb碱基对) |
EcoRⅠ | 14kb |
PstⅠ | 2.5kb、11.5kb |
EcoRⅠ+PstⅠ | 2.5kb、5.5kb/6.0kb |
(5)检测筛选是一个重要步骤.图3表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法,以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌.培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有_____.从筛选结果分析,含目的基因的是_____(填编号)菌落中的细菌.