【题目】(1)基因工程操作过程的实现至少需要三种必要的工具:限制性核酸内切酶、运载体、_____。
(2)下列有关限制性核酸内切酶的描述,正确的是_____
A.从反应类型来看,限制性核酸内切酶催化的是一种水解反应
B.限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
C.限制性核酸内切酶的活性受温度、pH的影响
D.质粒分子经限制性核酸内切酶切割后,含有2个游离的磷酸基团.
E.限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越小
(3)与“限制性核酸内切酶”作用部位完全相同的酶是_____。
A.逆转录酶 B.RNA聚合酶 C.DNA连接酶 D.解旋酶![]()
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
识别序列及 切割位点 | G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | G↓AATTC CTTAA↑G | CCC↓GGG GGG↑CCC |
(4)用限制酶HindⅢ,BamH I和二者的混合物分别降解一个4kb(1kb即1千个碱基对)大小的线性DNA分子,降解产物分别进行凝胶电泳,在电场的作用下,降解产物分开,如图3所示:P.F.Productions后期制作。据此分析,这两种限制性内切酶在该DNA分子上的限制位点数目是_____.
A.HindⅢl个,BamHI 2个 B.HindⅢ2个,BamHI 3个
C.HindⅢ2个,BamHI 1个 D.HindIII和BamHI各有2个
(5)DNA分子结构的稳定性与氢键数目的多少有关.若对图1中质粒进行改造,增加其稳定性,表中哪种酶的酶切位点会增多?_____.
A. BamH I B. HindⅢC.EcoR I D.Sma I
(6)用图1中的质粒和图2中的外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是_____。
(7)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____。