【题目】图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRIBamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRIBamHI在内的多种酶的酶切位点。据图13回答下列问题:

1)若要构建重组质粒,需要对目的基因进行测序,并将测序结果与___________酶的识别序列进行对比,以确定选用何种酶。该类酶作用的部位是____________键。

2)若用EcoRI酶对目的基因和质粒进行酶切,再用DNA连接酶处理,则由两个DNA片段连接形成的产物有______种。用上述几种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________

3)为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是__________________________________

4)酶与底物能特异性结合。以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有___

A.分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提rRNA

B.用无水乙醇处理菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上的光合色素

C.通过分子杂交手段,用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位

D.将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合,终止后者翻译,延迟果实成熟。

5)从变异的角度看,基因工程的原理是_____________;而植物细胞杂交的原理是_______________________

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