【题目】某化工厂土壤中含有大量的某种有毒化合物,为了从土壤中筛选出能够将这种化合物分解的菌株,改良土壤,改变当地生态环境。科研人员进行如下实验:
实验原理:固体培养基中某有毒化合物在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如下图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物分解的能力大小。
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实验步骤:
步骤一取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h。
步骤二在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良分解性能的菌株(如下表)。
菌株 | 透明圈直径(D) | 菌落直径(d) |
M一3一01I | 18.8 | 12.3 |
B3一5一6 | 20.7 | 8.0 |
T1一4一01 | 9.1 | 6.5 |
请分析回答:
(1)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________________。
(2)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37°C、200r·min- 1摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量得到如图所示曲线。结果表明最优良的解磷菌株是_____________。
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(3)若要对解磷菌计数需要进行纯化。在纯化菌种时接种了6个平板,每个平板均接种了0.lmL样品并培养。菌落数分别是210、230、470\190\29,则样品中菌种的数量为______个/mL。和直接用显微镜计数的结果对比__________(填写“偏大”或“偏小”),理由是_____________。
(4)对培养液进行灭菌时,高压灭菌锅的锅盖的排气管应放在灭菌桶___________(填写“内侧”或“外侧”)灭好菌后切断高压蒸汽灭菌锅热源,____________,打开放气阀放气,然后开启锅盖取出培养液。