【题目】酿酒酵母不能利用木糖制约了利用植物原料生产乙醇的经济效益。木酮糖激酶是木糖转化、利用的关键酶,为提高酵母细胞中木酮糖激酶的表达量,科研人员将两种启动子与木酮糖激酶基因结合并导入酿酒酵母细胞,构建能同时利用葡萄糖和木糖的重组酿酒酵母。下左图表示相关研究过程,右表是几种限制性内切酶的识别序列及切割位点。请回答:

限制酶

识别序列和

切割位点

EcoRⅠ

GAATTC

BamHⅠ

GGATCC

HindⅢ

AAGCTT

XhoⅠ

CTCGAG

NdeⅠ

CATATG

SalⅠ

GTCGAC

  

(1)重组质粒中终止子的作用是____。表中切割DNA后形成相同黏性末端的限制性内切酶是____,黏性末端为____

(2)过程③使用的限制性内切酶是________。过程⑤需先用LiAc处理酿酒酵母细胞,其目的是__________,使细胞处于能吸收环境中DNA的状态。

(3)结合图示分析,进行工程菌筛选时,在含四环素的培养基上长出的菌落不一定是导入重组质粒的酿酒酵母,这是因为____________

(4)研究人员对筛选得到的两种重组酵母(甲中导入启动子A,乙中导入启动子B)细胞中木酮糖激酶活力及发酵乙醇得率进行比较(发酵条件:1 L 15 g·L-1的葡萄糖和50 g·L-1的木糖培养基中,120 h)结果如下表。

从木酮糖激酶酶活力分析,可以得出的结论是启动子A的功能比启动子B____,但本实验中乙醇得率相差不大,其可能的原因是___________________________________________

 0  165021  165029  165035  165039  165045  165047  165051  165057  165059  165065  165071  165075  165077  165081  165087  165089  165095  165099  165101  165105  165107  165111  165113  165115  165116  165117  165119  165120  165121  165123  165125  165129  165131  165135  165137  165141  165147  165149  165155  165159  165161  165165  165171  165177  165179  165185  165189  165191  165197  165201  165207  165215  170175 

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