【题目】为生产具有特定性能的α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因工程大量制备琢α-淀粉酶,实验流程见下图。请回答下列问题:
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(1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先合成两条引物,并获得细菌的_______________________。
(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的____________________端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的_________________________。
(3)进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中________的设定与引物有关,________的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
①加热至90~95℃(变性)
②冷却至55~60℃(复性)
③加热至70~75℃(延伸)
④90~95℃维持时间
⑤55~60℃维持时间
⑥70~75℃维持时间
(4)下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:
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图中虚线框内mRNA片段包含________个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。
(5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如下:
缓冲液 | 50 mmol/LNa2HPO4-KH2PO4 | 50 mmol/LGly-NaOH | 50 mmol/LTris-HCl | ||||||||||
pH | 6.0 | 6.5 | 7.0 | 7.5 | 7.5 | 8.0 | 8.5 | 9.0 | 9.0 | 9.5 | 10.0 | 10.5 | |
酶相对活性% | 25.4 | 40.2 | 49.8 | 63.2 | 70.1 | 99.5 | 95.5 | 85.3 | 68.1 | 63.7 | 41.5 | 20.8 | |
根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为___________________________
【题目】为研究不同浓度的纳米银对蓝藻光合作用和细胞呼吸的影响,研究人员用不浓度的纳米银溶液培养蓝藻,实验结果如下表所示。请回答下列问题:
纳米银浓度 (mg·L-1) | 光合速率 (μmolO2·m-2·s-1) | 细胞呼吸速率 (μmolO2·m-2·s-1) | 叶绿素a含量 (mg·g-1) |
0 | 10 | 1 | 0.070 |
1 | 3.3 | 0.3 | 0.025 |
5 | 1.2 | 0.2 | 0.018 |
10 | 0.201 | 0.001 | 0.005 |
(1)由表中数据可知,纳米银对蓝藻的光合作用有抑制作用,据表分析其主要原因是____________________________________________。
(2)蓝藻的遗传物质主要存在于___________,其细胞内遗传信息的传递途径是______________________(用箭头和文字表示)。
(3)在测定纳米银对蓝藻细胞呼吸的影响时,应在___________环境中进行实验。将在5mg·L-1纳米银条件下培养一段时间的蓝藻取出后置于不含纳米银的条件下培养,蓝藻细胞呼吸速率始终低于1molO2·m-2·s-1,根据上表推测,主要的原因是______________________。蓝藻细胞消耗氧气的场所是___________。