【题目】图甲中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点,图乙为某种基因表达载体示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素时,需用到图乙所示质粒以及图甲所示的有关酶。请回答下列问题:

(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有_________________(多选题,填序号)。

①能自我复制 ②具有标记基因 ③能启动外源目的基因的转录和翻译 ④含有多个酶切位点

(2)可以从下列哪些人体细胞中获取生产人胰岛素的目的基因____________(多选题,填序号)。

①消化道黏膜上皮细胞 ②胰岛A细胞 ③胰岛B细胞 ④成熟红细胞

(3)经BamHⅠ酶切割得到的目的基因__________(填“能”或“不能”)与图乙所示质粒被Sau3AⅠ酶切后的产物连接,理由是______________________

(4)将人胰岛素基因与图乙所示质粒所拼接的重组质粒导入到大肠杆菌的常用方法是__________,检测目的基因是否导入成功,可用含有___________的培养基进行初步筛选。目的基因成功表达的标志是_______

(5)已知图乙所示质粒经EcoRⅠ和Sau3AⅠ联合酶切后形成2.0kb和4.2kb(lkb=1000对碱基)两种DNA片段。若将0.8kb的单个基因插在质粒的Sau3AⅠ位点处,所形成的重组质粒用EcoRⅠ和Sau3AⅠ联合酶切后,能形成的DNA片段长度分别为___________________

 0  164280  164288  164294  164298  164304  164306  164310  164316  164318  164324  164330  164334  164336  164340  164346  164348  164354  164358  164360  164364  164366  164370  164372  164374  164375  164376  164378  164379  164380  164382  164384  164388  164390  164394  164396  164400  164406  164408  164414  164418  164420  164424  164430  164436  164438  164444  164448  164450  164456  164460  164466  164474  170175 

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