【题目】变异链球菌在牙面的粘附、集聚是龋齿发生的先决条件,转基因可食防龋疫苗是通过基因工程技术,将变异链球菌中与龋齿发生密切相关的抗原基因(PAcA基因)转入植物的表达载体中,利用植物生物反应器生产的可食用基因工程疫苗。

(1)转基因植物的制备:

单一使用PAcA基因,机体免疫应答不理想,霍乱毒素中有增强机体免疫应答的氨基酸序列(CTB),将CTB基因与PAcA基因连接成嵌合(PAcA-CTB)基因,作为_______与Ti质粒的T-DNA拼接,并用_______法导入离体的黄瓜叶肉细胞中,经植物组织培养获得转基因植株。

(2)转基因植株目的基因的PCR鉴定:已知PAcA-CTB基因部分序列如下

5’---CCGTGT…………ATGCCT---3’

3’---GGCACA…………TACGGA---5’

根据上述序列选择引物__________(填字母)进行PCR。

A. 引物:5′-GGCACA-3′

B. 引物:5′-AGGCAT-3′

C. 引物:5′-CCGUGU-3′

D. 引物:5′-CCGTGT-3′

反应结束后,电泳检测PCR产物,结果如图(1来自未转化植株,2是含PAcA-CTB基因的质粒,3-10来自转基因植物),从结果可以看出,__________号植物含有PAcA-CTB基因。

(3)对上述含PAcA-CTB基因的植株进一步研究,发现其中一些植株体细胞中含两个PAcA-CTB基因(用字母A表示,基因间无累加效应)。为了确定这两个基因与染色体的位置关系,研究人员单独种植每株黄瓜,将同一植株上雄花花粉授到雌花柱头上,通过子一代表现型及其分离比进行分析:

①若F1中疫苗植株∶非疫苗植株=__________,则PAcA-CTB基因位于非同源染色体上,基因与染色体的位置关系如图甲所示。

②若F1中疫苗植株∶非疫苗植株=3∶1,则两个基因位于__________,请在图乙中标出基因。③若F1全为疫苗植株,则两个基因位于__________,请在图丙中标出基因。

(4)上述三种基因与染色体的位置关系适于进行推广种植的是两个基因位于__________的植株。多年后,在子代中出现了非疫苗植株,请推测三种可能的原因。

【题目】降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图。

在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:

(1)Klenow酶是一种________酶,合成的双链DNA________个碱基对。

(2)获得的双链DNAEcoRⅠ(识别序列和切割位点—G↓AATTC—)BamHⅠ(识别序列和切割位点—G↓GATCC—)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它_______________________________________________________________________________

_______________________________________________________

设计EcoRⅠBamHⅠ双酶切的目的是_______________________________________________________________________________

_____________________________________________________

要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有________

(3)DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是

______________________________________________________

______________________________________________________

(4)上述制备该新型降钙素,运用的现代生物工程技术是________

 0  161072  161080  161086  161090  161096  161098  161102  161108  161110  161116  161122  161126  161128  161132  161138  161140  161146  161150  161152  161156  161158  161162  161164  161166  161167  161168  161170  161171  161172  161174  161176  161180  161182  161186  161188  161192  161198  161200  161206  161210  161212  161216  161222  161228  161230  161236  161240  161242  161248  161252  161258  161266  170175 

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