【题目】鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:

(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了_____________________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是_________

A.Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点

B.目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点

C.酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D.酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________,步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是___________

(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验,接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期,而转基因植株在第______天才进入平台期,但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性,但抗性较低,可能的原因有__________

 0  160329  160337  160343  160347  160353  160355  160359  160365  160367  160373  160379  160383  160385  160389  160395  160397  160403  160407  160409  160413  160415  160419  160421  160423  160424  160425  160427  160428  160429  160431  160433  160437  160439  160443  160445  160449  160455  160457  160463  160467  160469  160473  160479  160485  160487  160493  160497  160499  160505  160509  160515  160523  170175 

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