【题目】玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性状,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤 I、II试验.
Ⅰ.获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如图.

(1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是 (单选).
①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A.①③
B.①④
C.②③
D.②④
(2)如表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果.据表可知,细胞脱分化时使用的激素是 , 自交系的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体.

激素
结果
自交系

2,4﹣D(2.0mg/L)

6﹣BA(0.5mg/L)

IBA(2.0mg/L)

愈伤组织形成率(%)

芽的分化率(%)

根的诱导率(%)

99

13

90

85

80

87

88

83

12

16

85

83


(3)农杆菌转化愈伤组织时,T﹣DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞.筛选转化的愈伤组织,需使用含的选择培养基.
(4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长.含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色.用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是 (多选).
A.无农杆菌附着的未转化愈伤组织
B.无农杆菌附着的转化愈伤组织
C.农杆菌附着的未转化愈伤组织
D.农杆菌附着的转化愈伤组织
(5)组织培养获得的转基因植株(核DNA中仅插入一个G基因)进行自交,在子代含G基因的植株中,纯合子占 . 继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系A.
II.通过回交使自交系B获得抗除草剂性状
(6)抗除草剂自交系A(GG)与自交系B杂交产生F1 , 然后进行多轮回交(如图).自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代

(7)假设子代生活力一致,请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例,并在图1中画出对应的折线图.若回交后每代不进行鉴定筛选,直接回交,请在图2中画出相应的折线图.

(8)如表是鉴定含G基因植株的4种方法.请预测同一后代群体中,4种方法检出的含G基因植株的比例,从小到大依次是

方法

检测对象

检测目标

检出的含G基因植株的比例

PCR扩增

基因组DNA

G基因

x1

分子杂交

总mRNA

G基因转录产物

x2

抗原﹣抗体杂交

总蛋白质

G基因编码的蛋白质

x3

喷洒除草剂

幼苗

抗除草剂幼苗

x4

对Hn继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系.

 0  157779  157787  157793  157797  157803  157805  157809  157815  157817  157823  157829  157833  157835  157839  157845  157847  157853  157857  157859  157863  157865  157869  157871  157873  157874  157875  157877  157878  157879  157881  157883  157887  157889  157893  157895  157899  157905  157907  157913  157917  157919  157923  157929  157935  157937  157943  157947  157949  157955  157959  157965  157973  170175 

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