【题目】科研人员以酵母菌为受体细胞,通过转基因技术研究水稻某种病毒的蛋白P与水稻蛋白的相互作用。

(1)实验所用的缺陷型酵母菌不能合成组氨酸、色氨酸和亮氨酸,培养时在培养基中需添加____________________,酵母菌才能在细胞内的核糖体上合成生长所需的__________

(2)将蛋白P基因连接在质粒K(具有色氨酸合成基因)上的BD蛋白合成基因之后,构建含有BD-P融合基因的__________。将其导入缺陷型酵母菌,用不含__________的选择培养基筛选转化的酵母菌获得目的菌落,从这些菌落中可筛选得到基因成功表达BD-P融合蛋白的酵母菌A。

(3)为研究蛋白P能够和哪些水稻蛋白发生相互作用,科研人员提取水稻细胞的mRNA,在逆转录酶作用下获得cDNA,用限制酶切后再将其与质粒T(具有亮氨酸合成基因)上的AD蛋白合成基因连接,形成具重组质粒T,构建水稻cDNA文库。然后取水稻cDNA文库的多个重组质粒T分别转化到__________中,将转化后的酵母菌接种在不含__________的培养基中培养,获得了分散的多个单菌落。经检测这些酵母菌中含有4种水稻蛋白,说明这4种水稻蛋白能够____________________

该实验的实验原理是:在实验用酵母菌细胞内,组氨酸合成基因的转录受到调控(如下图所示),若被测的水稻蛋白能与病毒的蛋白P结合,则BD、AD两个蛋白可以充分接近,组氨酸合成基因才能转录。

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