【题目】华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后,提炼而成的中药复方制剂,是我国经典抗肿瘤药物。研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理,进行了一系列实验。请根据题中信息回答下列问题。

Ⅰ.肝癌HepG-2细胞的培养:

(1)培养肝癌HepG-2细胞时,在培养基中加入适量的__________以补充合成培养基中缺乏的物质,为防止培养过程发生污染要加入______。此外,每48h更换1次培养液,目的是__________。同时还要提供适宜的温度、______、氧气和二氧化碳等环境条件。

Ⅱ.探究华蟾素药效作用机理的实验:

(2)用不同浓度的华蟾素注射液分别处理HepG-2细胞12h、24h和48h,测定华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响,结果如下图。

由图甲可知,华蟾素能有效地______肝癌HepG-2细胞增殖,且与______呈正相关。图乙的结果进一步表明,华蟾素对肝癌HepG-2细胞增殖的影响体现在______________

(3)DNA拓扑异构酶Ⅱ(简称TopoⅡ)为真核生物所必需,在DNA复制、转录、重组及形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用,TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞。华蟾素注射液处理HepG-2细胞48h后,采用RT-PCR技术检测TopoⅡ基因的表达情况,结果如图丙。

①RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应。其主要原理是:提取HepG-2细胞中的总RNA, 以一段_______作为引物,在________酶的作用下合成cDNA,再以cDNA为模板进行_________

②由图丙可知,华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是______

 0  152617  152625  152631  152635  152641  152643  152647  152653  152655  152661  152667  152671  152673  152677  152683  152685  152691  152695  152697  152701  152703  152707  152709  152711  152712  152713  152715  152716  152717  152719  152721  152725  152727  152731  152733  152737  152743  152745  152751  152755  152757  152761  152767  152773  152775  152781  152785  152787  152793  152797  152803  152811  170175 

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