【题目】(20分)玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性质,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤III试验。

.获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。

(1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是______(单选)。

Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点

G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点

酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同

酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A. B. C. D.

(2)下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的激素是_______________,自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

(3)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织,需使用含_____________________的选择培养基。

(4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是_______________(多选)。

A.无农杆菌附着的未转化愈伤组织

B.无农杆菌附着的转化愈伤组织

C.农杆菌附着的未转化愈伤组织

D.农杆菌附着的转化愈伤组织

(5)组织培养获得的转基因植株(核DNA中仅插入一个G基因)进行自交,在子代含G基因的植株中,纯合子占_____________。继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系A。

II.通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

(6)抗除草剂自交系A(GG)与自交系B杂交产生F1,然后进行多轮回交(下图)。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。

(7)假设子代生活力一致,请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例,并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选,直接回交,请在图2中画出相应的折线图。

(8)下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中,4种方法检出的含G基因植株的比例,从小到大依次是________。

方法 检测对象 检测目标 检出的含G基因植株的比例

PCR扩增 基因组DNA G基因 x1

分子杂交 总mRNA G基因转录产物 x2

抗原-抗体杂交 总蛋白质 G基因编码的蛋白质 x3

喷洒除草剂 幼苗 抗除草剂幼苗 x4

对Hn继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系

 0  152254  152262  152268  152272  152278  152280  152284  152290  152292  152298  152304  152308  152310  152314  152320  152322  152328  152332  152334  152338  152340  152344  152346  152348  152349  152350  152352  152353  152354  152356  152358  152362  152364  152368  152370  152374  152380  152382  152388  152392  152394  152398  152404  152410  152412  152418  152422  152424  152430  152434  152440  152448  170175 

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