【题目】GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:

(1)完成图中A过程必需的工具是 ;该基因治疗的受体细胞为 。

(2)基因工程最核心的步骤是 。

(3)若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图中的 限制酶进行酶切。

(4)限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。

(5)下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,正确的是_______。

A.限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列

B.限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同

C.使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解

D.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的

(6)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为 个,反向连接的重组载体产生片段有 (多选)。

①100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp

 0  148767  148775  148781  148785  148791  148793  148797  148803  148805  148811  148817  148821  148823  148827  148833  148835  148841  148845  148847  148851  148853  148857  148859  148861  148862  148863  148865  148866  148867  148869  148871  148875  148877  148881  148883  148887  148893  148895  148901  148905  148907  148911  148917  148923  148925  148931  148935  148937  148943  148947  148953  148961  170175 

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