【题目】回答下列有关遗传信息传递与表达的问题.

野生型大肠杆菌(E.coli)具有完整的LacZ基因,该基因编码的β﹣半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成,两部分均存在时可将无色化合物X﹣gal切割成半乳糖和深蓝色的物质5﹣溴﹣4﹣靛蓝,从而使整个菌落变为蓝色.DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株,对氨苄青霉素敏感,其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留,但编码α片段的序列缺失.

(1)根据中心法则,LacZ基因控制β﹣半乳糖苷酶合成的过程主要包括 两个环节.

(2)某研究小组构建了质粒pXY﹣1,如图甲所示,该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β﹣半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ’.图乙显示的则是Nae I、Hpa II和Kas I三种限制性内切酶的识别序列(表示切割位点).

若以该质粒作为运载体,将外源目的基因(图丙)导入大肠杆菌DH5α菌株,在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是 .此外,还需用到的另一种酶是

(3)若用涂布有氨苄青霉素和X﹣gal的固体培养基筛选上一题中含目的基因的受体菌,下列说法中正确的有 .(多选)

A.没有导入任何质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色

B.导入了pXY﹣1空载体质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色

C.导入了pXY﹣1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色

D.导入了pXY﹣1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色

(4)现从上一题的固体培养基平板上挑取一个重组菌落,经扩大培养后提取质粒,分别用不同的限制性内切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如表所示:

所用限制性内切酶

所得条带长度

BamHI、ScaI双酶切

1230bp、2770bp

HpaII、ScaI双酶切

460bp、1240bp、xbp

据此可知,目的基因全长为 bp,在其内部存在 (填限制酶名称)的切割位点,表中字母x代表的数值应为

 0  148019  148027  148033  148037  148043  148045  148049  148055  148057  148063  148069  148073  148075  148079  148085  148087  148093  148097  148099  148103  148105  148109  148111  148113  148114  148115  148117  148118  148119  148121  148123  148127  148129  148133  148135  148139  148145  148147  148153  148157  148159  148163  148169  148175  148177  148183  148187  148189  148195  148199  148205  148213  170175 

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