【题目】研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。

1选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_____低表达高表达。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白抗原时,应构建____________区基因,转入原核细胞表达并提纯。

2将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与______________细胞进行融合,使用的化学诱导剂是_____________,细胞融合的原理是______________________。

3将融合细胞在_________________培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取有克隆生长的细胞培养液中的__________上清液沉淀细胞,应用_____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

4将筛选得到的杂交瘤细胞,经过______________或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体。

5治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建生物导弹,杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体____________的特点。

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