【题目】希尔反应是测定叶绿体活力的常用方法。希尔反应基本原理:光照下,叶绿体释放O2,同时氧化型DCIP(2,6一二氯酚靛酚)被还原,颜色由蓝色变成无色。DCIP颜色变化引起的吸光率变化可反映叶绿体活力。研究小组利用菠菜叶进行了叶绿体活力的测定实验。回答下列问题:
(1)制备叶绿体悬液:选取10g新鲜的菠菜叶加入研钵,研磨前加入适量的0.35mol/LNaCI溶液和pH7.8的酸碱缓冲液等;研磨成匀浆后,用纱布过滤,取滤液进行_____,分离得到叶绿体;将叶绿体置于______溶液中,以保证叶绿体的正常形态,获得叶绿体悬液。
(2)测定叶绿体活力:分组如下,并按下表加入试剂;测定各组吸光率。
试管号 | 磷酸缓 冲液(mL) | 叶绿体 悬液(mL) | 煮沸(min) | DCIP(mL) |
1 | 9.4 | 0.1 | - | 0.5 |
2 | 9.4 | 0.1 | 5 | 0.5 |
3 | 9.9 | 0.1 | - | - |
注:“一”表示不处理或不加入。
①希尔反应模拟了光合作用中_____阶段的部分变化,该阶段在叶绿体的_____中进行。氧化型DCIP在希尔反应中的作用,相当于_____在该阶段中的作用。
②煮沸处理后,需向2号试管中加入一定量的_____,以保证各试管中液体的量相等。
③3号试管的作用是_____。