【题目】回答下列(一)(二)小题

(一)请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题

(1)LB固体培养基:取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解,再加_________,灭菌备用。

(2)尿素固体培养基:先将适宜浓度的尿素溶液用_______灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤,因为G6玻璃砂漏斗________,故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。

(3)取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液,分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上,培养48h,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是______(A. 10-5稀释液+尿素固体培养基 B. 10-5稀释液+LB固体培养基 C. 10-4稀释液+尿素固体培养基 D. 10-4稀释液+LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现______,其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生______所致。

(4)制备固定化脲酶时,用石英砂吸附脲酶,装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用是_________

(二)某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。请回答:

(1)原生质体的分离:在无菌条件下,取烟草无菌苗的叶片,放入含有0.5mol/L甘露醇(维持较高渗透压)的_________混合液处理,经过离心纯化后获得原生质体。

(2)原生质体的培养:将原生质体进行培养,重新长出细胞壁,形成胚性细胞。此时,应该_________培养基中甘露醇浓度,以利于胚性细胞继续培养形成细胞团,然后经两条途径形成再生植株。途径一:细胞团经球形胚、_________和胚状体,最后发育成植株。途径二:细胞团增殖为愈伤组织,然后在发芽培养基上诱导出芽,切割芽经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是_________,胚性细胞的主要特点是:_________

(A.液泡小、细胞核小 B.液泡大,细胞核大 C.液泡大,细胞核小 D.液泡小、细胞核大)

(3)为了对烟草的某些性状进行改良,分离的到两种烟草的原生质体后,通过_________方法将他们的遗传物质组合在一起,经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的DNA,采用_________扩增相关基因,来鉴定遗传物质是否成功重组。

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