某研究性学习小组利用荧光素酶生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量,以研究人参细胞能量代谢的特点。

实验原理:荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,进行反应发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;当荧光素和荧光素酶都足量时,在一定范围内,ATP的含量与发光强度成正比。

实验步骤:

步骤一:ATP的提取:称取一定量的人参愈伤组织,研磨后沸水浴10 min,冷却至室温,离心,取上清液。

步骤二:ATP的测定:吸取一定量的上清液,放入分光光度计反应室内,并注入适量的所需物质,在有氧等适宜条件下进行反应,记录发光强度并计算ATP含量。

请回答下列问题。

(1)步骤一中的沸水浴处理,使酶的________被破坏而失活。

(2)步骤二注入的物质中,属于反应物的是________;分光光度计反应室内能量形式的转换是__________________________________________________。

(3)荧光素酶价格昂贵,为能准确测定出ATP的含量,又能节省酶的用量,学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”,实验结果如图。

①学习小组配制了1×10-8mol/L ATP标准液、70 mg/L荧光素溶液(过量)和浓度分别为______________荧光素酶溶液进行实验。

②结果表明:图中________点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,这是因为________。

 0  143266  143274  143280  143284  143290  143292  143296  143302  143304  143310  143316  143320  143322  143326  143332  143334  143340  143344  143346  143350  143352  143356  143358  143360  143361  143362  143364  143365  143366  143368  143370  143374  143376  143380  143382  143386  143392  143394  143400  143404  143406  143410  143416  143422  143424  143430  143434  143436  143442  143446  143452  143460  170175 

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