15.在“植物细胞的质壁分离与复原”实验中,撕取洋葱鳞片叶内表皮容易获得只具有单层细胞的材料,但内表皮是无色透明的,用其直接作观察材料,效果不理想.中性红是一种弱碱性pH指示剂,变色范围为pH 6.4~8.0之间(酸性为红色,碱性为黄色).植物的活细胞能大量吸收中性红并进入液泡;死细胞用中性红染色后,不产生液泡着色现象,但可使细胞核染色.回答下列实验中的相关问题:
(1)实验步骤
步骤一:用小刀在鳞片叶内侧划成约2cm2的小块,两手握住小块的两侧并朝内表皮方向对折,露出内表皮,然后用镊子取下小片内表皮.
步骤二:将取下的内表皮放入0.03%的中性红溶液中染色3min后,放在清水中浸泡10min,以褪去细胞壁的颜色.
步骤三:在洁净的载玻片中央加一滴清水,将上述内表皮置于清水中,盖上盖玻片.
步骤四:从盖玻片一侧滴加0.5g/mL的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引.这样的操作需要重复多次,使细胞浸润在蔗糖溶液中.
步骤五:在显微镜下观察,结果如图所示.
步骤六:将装片上的蔗糖溶液置换成清水,观察质壁分离复原现象.
(2)现象分析
①观察结果显示,液泡的颜色为桃红色,由此可判断细胞液偏酸性.
②图中A处的物质是蔗糖溶液.细胞B的细胞核被着色,而其他结构没有着色,可能的原因是该细胞已死亡.
③一段时间后,能观察到质壁分离无法复原,原因可能是蔗糖溶液浓度过高,导致细胞失水过多而死亡.
④换用一定浓度的KNO3溶液重复该实验,发现在没有将KNO3溶液置换成清水的情况下,质壁分离的细胞发生了自动复原现象.在此过程中,物质进出细胞的方式有自由(简单)扩散、主动运输.
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