17.制备固定化酵母细胞实验流程图为:酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞.某科研小组对固定化技术在酿酒酵母上的应用做了一些研究.下表是海藻酸钠浓度和氯化钙浓度对固定化酵母的影响实验数据表,下图是在相同的发酵条件下,固定化酵母与游离酵母3 次循环发酵的糖度变化比较曲线图,请分析回答下列问题:

海藻酸钠(%)22.5322.5322.53
CaCl2(%)222333444
固定化强度(g/30 个)930950990103011001140117011701160
酒精量(%)6.76.56.56.76.46.26.76.46.2
残糖量(%)2.52.752.752.602.652.652.652.752.75
(1)酵母细胞活化的方式是将干酵母加入适量水中,搅拌均匀,放置1h左右,活化的目的是让处于休眠状态的微生物恢复正常生活状态.
(2)配制海藻酸钠时,将海藻酸钠调成糊状,直至完全融化,用蒸馏水定容至10mL.实验中将刚溶化好的海藻酸钠溶液冷却的原因是防止温度过高杀死酵母菌.
(3)Ca2+是决定海藻酸钙固定化酵母机械强度的重要因素,根据表中数据分析,随着Ca2+浓度的增加,固定化酵母的强度增加,最终选择海藻酸钠与氯化钙的浓度分别为2%、4%时固定化效果好.海藻酸钠是一种多孔性载体,在一定浓度范围内选择较低的海藻酸钠的浓度进行固定化酵母,产生酒精量较高.但是如果海藻酸钠的浓度过低,产生酒精量很低的原因是形成的凝胶珠包埋的酵母细胞过少.
(4)由比较曲线图可以看出固定化酵母发酵速度较快,游离酵母在重复使用2 次后,其活性完全丧失,由此也可见固定酵母细胞的优点是可以重复使用.
16.在固体培养基中加入溶解性差、但可被微生物利用的酪蛋白,形成浑浊、不透明的培养基背景.当培养基中的酪蛋白被微生物分泌的蛋白酶分解后,菌落(沉淀圈)的周围就会形成透明圈(如右图).透明圈的大小反映了菌落利用蛋白质的能力.利用这种培养基可以筛选产蛋白酶菌株.下面是生物研究小组从土壤中筛选产蛋白酶菌株的方案.请协助完成方案,并回答有关问题:
实验步骤:
第一步:制备固体平板培养基:计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板.
第二步:运用稀释涂布平板法分离纯化菌株:分别梯度稀释制备土壤浸出液,吸取少量的土壤浸出液,注入培养基平板中,涂布均匀.然后置于温度28℃的恒温箱中,培养36h.
第三步:初筛菌种:从上一步培养基平板上挑选单细胞菌落,分别接种于筛选培养基中,在28℃下培养48h.挑选透明圈大而沉淀圈小的菌株,作为初筛菌株.
回答下列问题:
(1)补全“制备微生物固体培养基”的主要操作步骤①灭菌,②倒平板.
(2)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌);灭菌后的培养基应适当冷却到50℃后,在酒精灯附近倒平板.
(3)“菌落”在生态学上属于种群层次的生命系统,“稀释涂布平板法”纯化菌种的原理是在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将分散成单个细胞,从而能够在培养基表面形成单个的菌落.
(4)初筛菌株的菌落周围“透明圈大”说明沉淀圈中的微生物分泌的蛋白酶活性高.
(5)为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在3块相同平板上划线,结果其中一块平板的各划线区均未见菌落生长,最可能的原因是接种环温度过高,菌被杀死.
(6)研究人员将初筛菌株接种于发酵液中,在适宜条件下培养,并每隔一定时间取样检测发酵液中蛋白酶的活性,最终发现在培养的早期,发酵液中蛋白酶活性迅速升高,这可能与培养液中菌株数量增加、分泌的蛋白酶增多有关.
 0  138132  138140  138146  138150  138156  138158  138162  138168  138170  138176  138182  138186  138188  138192  138198  138200  138206  138210  138212  138216  138218  138222  138224  138226  138227  138228  138230  138231  138232  138234  138236  138240  138242  138246  138248  138252  138258  138260  138266  138270  138272  138276  138282  138288  138290  138296  138300  138302  138308  138312  138318  138326  170175 

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