4.胚胎干细胞(ES细胞)在生物学研究中具有十分重要的应用价值.

(1)图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的ES细胞中,再将改造后的ES细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程.在目的基因获取和基因表达载体构建过程中使用的工具酶有DNA连接酶和限制性核酸内切酶.
(2)图中完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物有3种重组DNA分子;第Ⅲ步操作后,还需经过筛选含小鼠棕褐毛基因的胚胎干细胞的过程,才能将该ES细胞注射到囊胚中.
(3)ES细胞在功能上具有发育的全能性的特点;目前研究人员正尝试通过科技手段利用ES细胞经过特殊诱导,为因故失去手的患者提供新的“手”,该过程揭示了细胞分化和凋亡的机理.
(4)已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断,一般情况下,细胞中有D或S途径即能分裂增殖.人淋巴细胞中虽然有这两种DNA合成途径,但一般不分裂增殖.鼠ES细胞中只有D途径,但能不断分裂增殖.将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞.若要从培养液中分离出杂种细胞,写出实验方法(不考虑机械方法),并说明理由.
方法:在上述试管中加入氨基嘌呤后,收集能分裂增殖的细胞.
理由:淋巴细胞不能分裂,鼠ES细胞的D途径被阻断,也不能分裂,而杂种细胞中有S途径,可分裂增殖.
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