6.为培育矮秆性状的水稻,科研人员进行了下列研究.
(1)科研人员构建含T-DNA的重组质粒,在T-DNA区段中含有已知序列的潮霉素抗性基因.将水稻W的愈伤组织浸入含有上述重组质粒的农杆菌菌液中,20min后转入水稻愈伤组织培养基培养,3d后转入含潮霉素的培养基中筛选抗性愈伤组织.诱导愈伤组织的材料取自水稻W的未成熟胚,其原因是分化程度较低,易于脱分化.
(2)提取转基因水稻W叶片细胞的总DNA,利用T-DNA区段中的潮霉素抗性基因序列设计引物,用PCR法对转基因水稻进行分子(水平)鉴定.
(3)将抗性愈伤组织再分化形成的水稻幼苗移栽至大田,得到T0代转基因水稻.以(非转基因)水稻W为对照,对
T0代水稻进行表型分析,筛选得到矮秆突变体G.判断G的矮秆突变性状是否为可遗传变异的常用方法是观察G的自交后代(T1代)是否发生性状分离.
(4)从T1代筛选矮秆突变体,T2~T4每代均种植矮秆突变体,各代植株上剪取叶片进行潮霉素抗性检测,统计T2代和T4代潮霉素抗性和株高表型,得到如表结果.
潮霉素
抗性
世代植株数目
矮秆正常株高
抗性T22590
T42980
非抗性T2080
T4092
据表分析,T2和T4代矮秆:正常株高均符合3:1的分离比,说明矮秆突变性状是由一对基因控制的显性遗传,表中矮秆植株均表现潮霉素抗性,正常株高植株均表现为潮霉素敏感的结果说明,T-DNA以单点方式插入到水稻基因组中,使控制株高的基因失活.
 0  133872  133880  133886  133890  133896  133898  133902  133908  133910  133916  133922  133926  133928  133932  133938  133940  133946  133950  133952  133956  133958  133962  133964  133966  133967  133968  133970  133971  133972  133974  133976  133980  133982  133986  133988  133992  133998  134000  134006  134010  134012  134016  134022  134028  134030  134036  134040  134042  134048  134052  134058  134066  170175 

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