14.基因工程基本操作流程如图,请据图分析回答:
(1)图中A是目的基因(外源基因);在基因工程中,需要在限制性核酸内切酶和DNA连接 酶的作用下才能完成剪接过程.
(2)在如图基因工程的操作过程中,遵循碱基互补配对原则的步骤有②④.(用图中序号表示)
(3)从分子水平分析不同种生物之间的基因移植成功的主要原因是不同生物DNA分子具有相同的双螺旋结构,这也说明了不同生物共用一套遗传密码.
(4)Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系.在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平.①图中X表示逆转录过程.
②从基因组数据库中查询Bcl-2mRNA的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成引物用于PCR扩增,PCR扩增过程第一轮循环的模板是Bcl-2cDNA.在获得单链模板的方式上,PCR扩增与体内DNA复制不同,前者通过高温解开双链,后者通过解旋酶解开双链.
(5)将基因表达载体导入受体的受精卵中常用显微注射法,在培育转基因植物常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是农杆菌可感染植物,将目的基因转移到受体细胞中.
(6)研究中发现,番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用,导致害虫无法消化食物而被杀死,人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内,玉米获得了与番茄相似的抗虫性状,玉米这种变异的来源是基因重组.
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