(2015秋•长春校级月考)为研究水稻D基因的功能,研究者将T﹣DNA插入到D基因中,致使该基因失活,失活后的基因记为d.现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验,统计母本植株的结实率,结果如下表所示.

杂交编号

亲本组合

结实数/授粉的小花数

结实率

♀DD×♂dd

16/158

10%

♀dd×♂DD

77/154

50%

♀DD×♂DD

71/141

50%

(1)表中数据表明,D基因失活使 配子育性降低.为确定配子育性降低是由于D基因失活造成的,可将 作为目的基因,与载体连接后,导入到 (填“野生”或“突变”)植株的幼芽经过 形成的愈伤组织中,最后观察转基因水稻配子育性是否得到恢复.

(2)用 观察并比较野生植株和突变植株的配子形成,发现D基因失活不影响二者的 分裂.

(3)进一步研究表明,配子育性降低是因为D基因失活直接导致配子本身受精能力下降.若让杂交①的F1给杂交②的F1授粉,预期结实率为 ,所获得的F2植株的基因型及比例为

(4)为验证F2植株基因型及比例,研究者根据D基因、T﹣DNA的序列,设计了3种引物,如图所示:

随机选取F2植株若干,提取各植株的总DNA,分别用引物“Ⅰ+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR,检测是否扩增(完整的T﹣DNA过大,不能完成PCR).若 ,则相应植株的基因型为Dd;同理可判断其他基因型,进而统计各基因型比例.

(5)研究表明D基因表达产物(D蛋白)含有WD40(氨基酸序列),而通常含有WD40的蛋白都定位在细胞核内.为探究D蛋白是否为核蛋白,研究者将D基因与黄色荧光蛋白基因融合;同时将已知的核蛋白基因与蓝色荧光蛋白基因融合.再将两种融合基因导入植物原生质体表达系统,如果 ,则表明D蛋白是核蛋白.

 0  133822  133830  133836  133840  133846  133848  133852  133858  133860  133866  133872  133876  133878  133882  133888  133890  133896  133900  133902  133906  133908  133912  133914  133916  133917  133918  133920  133921  133922  133924  133926  133930  133932  133936  133938  133942  133948  133950  133956  133960  133962  133966  133972  133978  133980  133986  133990  133992  133998  134002  134008  134016  170175 

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