11．将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，下列有关此项技术的说法中不正确的是（　　）
A．动物细胞融合和动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础
B．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞直接放入培养液中就能融合为杂交瘤细胞
C．实验中杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖的方式是主动运输
D．按照培养基的用途分类，实验中筛选杂交瘤细胞的培养基是选择培养基
10．小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达．下列相关叙述正确的是（　　）
A．设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列
B．用PCR方法扩增目的基因时必须知道基因的全部序列
C．PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶
D．一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞
9．如图为单克隆抗体生产过程示意图，请据图回答问题：
（1）传统制备抗体的方法是向动物体内反复注射某种抗原，使B细胞和记忆细胞增殖、分化为浆细胞，浆细胞产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体
（2）与诱导植物原生质体融合不同的是，②过程还可以使用灭活诱导融合．
②过程诱导后，用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是即可大量增殖，又能产生特异性抗体．
（3）将经过③过程得到的能分泌专一抗体的杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔中，一段时间后从小鼠腹水中就可以提取大量的鼠源性单克隆抗体．
（4）给某患者连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病，开始病毒量明显减少，一段时间后，病毒量又开始上升，上升的原因可能是病毒发生了变异，也可能是人体产生了能与鼠源性抗体特异性结合的抗体，使鼠源性单抗不能发挥抗病毒的作用．
（5）研究人员可应用蛋白质工程技术，改造鼠源性单抗分子的结构，降低人体对鼠源性单抗的免疫反应．
8．以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原，利用细胞工程方法可制备出SARS病毒的单克隆抗体．请根据图回答以下问题：
（1）首先将特定的抗原注射入小鼠体内，然后从小鼠的脾脏中获得B淋巴细胞．
（2）将B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，融合过程中使用的与植物体细胞杂交不同的诱导因素是灭活的病毒．经过诱导后，考虑两两融合，能获得3种杂交细胞，因此还要用特定的选择性培养基进行筛选，通过多次最终筛选获得的杂种细胞应具有的特点是既能无限增殖，又能产生所需抗体．
（3）将杂交瘤细胞在体外条件下进行大规模培养，培养基是按照细胞的需求将各种营养物质按一定比例进行配制的，该培养基需加入糖、氨基酸、无机盐和促生长因子、微量元素及血清血浆等，通入二氧化碳的主要目的是维持pH稳定．
（4）该技术的基础是动物细胞培养，利用制备的单克隆抗体可准确地诊断出SARS病毒感染者，原理是针对SARS病毒的抗体具有特异性，可以与SARS病毒特异性结合．
7．2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书．下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

（1）④过程应用的主要生物技术是植物组织培养；该技术的过程主要包括脱分化和再分化两个阶段，利用的基本原理是植物细胞的全能型．
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的蛋白质，这属于蛋白质工程技术范畴．
（3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．如图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入启动子．
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的tms和tar（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于目的基因准确插入．第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等．
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是在含卡那霉素的培养基能够生长，在含四环素的培养基上不能生长．
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC．
6．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，所采用的技术有（　　）
①细胞培养技术②细胞融合技术③抗体检测技术④细胞筛选⑤核移植技术⑥免疫学技术．
A．②③④B．①②③④⑥C．②③⑤D．④⑤⑥
5．生产单克隆抗体时，要在培养基中加入特定的试剂筛选出杂交瘤细胞．下列可作为这种试剂的是（　　）
A．能选择性地抑制骨髓瘤细胞DNA复制的试剂
B．能激活B淋巴细胞的原癌基因的试剂
C．能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质合成的试剂
D．能抑制B淋巴细胞DNA复制的试剂
4．2009年春末，甲型H1N1流感病毒成为全人类共同的敌人．某生物工程公司拟利用细胞工程方法，以甲型H1N1病毒衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体．相关叙述正确的是（　　）
A．将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B．体外培养单个浆细胞还可以获得大量针对甲型H1N1病毒的淋巴因子
C．将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D．利用该单克隆抗体与甲型H1N1病毒衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
3．埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别．EBO结构及基因组如图1所示．目前尚无针对该病毒的特效药或疫苗．

（1）埃博拉病毒（EBO）的遗传物质是RNA，EBO病毒容易变异的原因是RNA是单链结构，稳定性较差．．
（2）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，获得纯净的单一品种抗体，其特点是特异性强、灵敏度高、反应快（产量大），可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒（EBO）．
（3）图2表示转基因技术生产埃博拉病毒蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程．
①该技术的目的基因最好选择GP蛋白基因（GP或GP基因）．
②实验发现，用昆虫细胞替代酵母菌承担辅助重组质粒与重组病毒的共转染，也能收集到目的基因表达的蛋白质，这一现象说明不同生物共用一套遗传密码．
③以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全，其原因是蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构．
④重组病毒中须除去腺病毒复制激活基因（E），目的是使重组病毒不能在人体内大量复制，提高了疫苗的安全性．
2．胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法．利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向诱导人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）分化成胰岛B细胞．请回答下列问题：

（1）取人羊膜组织刮除血块、上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用胰蛋白酶处理，去除细胞表面（糖）蛋白，使细胞分散开，最终制成hAMSCs悬液．将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养，先后出现细胞贴壁生长、接触抑制现象象，直至细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养．
（2）取传至第3代的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE进行诱导分化培养．该代hAMSCs能保持细胞正常的（二倍体）核型．诱导分化培养15天后，提取细胞的RNA（或mRNA），用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞．
（3）用人的杂交瘤细胞来生产人源单克隆抗体难以成功，因此单克隆抗体大都来自鼠源．但鼠源单抗在人体内使用，会产生较强的免疫原性，为解决这一问题，发明了嵌合抗体．大致过程如图所示，嵌合抗体能降低鼠源抗体的免疫原性，从图中可以推测，免疫原性的产生主要与抗体的C（选填“V区”、“C区”）有关．构建的人鼠嵌合抗体基因表达载体除了标记基因和目的基因外，还有启动子、终止子．
（4）科学家们用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用”的结构基因．他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成杂交瘤细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞．这些细胞既保持了合成大鼠肝细胞3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠干细胞的这3种蛋白，但是在正常的小鼠成纤维细胞中从不合成这些．由此可见，融合实验证明了小鼠成纤维细胞含有不表达的但肝细胞专一表达的基因，在特定条件下这些“闲置基因”也可表达．
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